Yaohai Bio-Pharma предлагает услуги по тестированию и анализу данных N-концевой последовательности на основе жидкостной хроматографии-масс-спектрометрии (LC-MS) или метода деградации Эдмана, что позволяет определить аминокислоты в соответствующих терминалах белка интереса. Модификации N-конца также можно проанализировать с помощью LC-MS.
Мы принимали участие в характеристиках структуры белков различных крупных молекул, включая рекомбинантные субъединичные вакцины, нанотеллы/VHHs/однодоменные антитела (sdAbs), фрагменты антител, гормоны/пептиды, цитокины, факторы роста (GF), ферменты, коллагены и т.д.
Регуляторные требования для секвенирования N-конца
Согласно руководству ICH Q6B необходимо подтвердить последовательность вашего белка и исследовать терминалы на наличие возможных вариаций.
Методы секвенирования N-конца
| Анализ |
Метод |
| Секвенирование N-конца |
Деградация Эдмана, жидкостная хроматография-масс-спектрометрия (LC-MS) |
Процедуры
LC-MS
1. Флуоресцентная маркировка N-терминальной части белка
2. Многократные расщепления
3. Анализ методом ЖК-МС/Масс-спектрометрия (МС)
Эдманская деградация
1. Электрофорез в геле с дodeцилсульфатом натрия (SDS) для целевого белка
2. Перенос геля на мембраны из поливинилидена фторида (PVDF) и окрашивание
3. Выявление и вырезание полосы целевого белка
4. Эдманская секвенция N-конца
5. Анализ данных
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
