Анализ сайтов N-гликозилирования критически важен для понимания функций гликанов. Yaohai Bio-Pharma использует жидкостную хроматографию-масс-спектрометрию (LC-MS) после ферментативного отщепления для анализа сайтов N-гликозилирования.
Мы принимали участие в характеристиках структуры белков различных крупных молекул, включая рекомбинантные субъединичные вакцины, нанотеллы/VHHs/однодоменные антитела (sdAbs), фрагменты антител, гормоны/пептиды, цитокины, факторы роста (GF), ферменты, коллагены и т.д.
Регуляторные требования к сайтам N-гликозилирования
Согласно руководству ICH Q6B, «для гликопротеинов определяется содержание углеводов (нейтральные сахара, аминосахара и сиаловые кислоты). Кроме того, анализируется структура углеводных цепей, паттерн олигосахаридов (профиль антенны) и сайты гликозилирования полипептидной цепи настолько полно, насколько это возможно».
Аналитический метод
Анализ |
Методы |
Сайт N-гликозилирования |
Жидкостная хроматография-масс-спектрометрия (LC-MS) после ферментативного расщепления |
Процедуры
1. Ферментативное расщепление белка с использованием трипсина или другого протеаза
2. Разделение фрагментов гликопептидов
3. Подтвердите сайт N-гликозилирования с помощью LC-MS
4. Проанализируйте данные