Nøkelenzymer for lang-RNA-produksjon
mRNA, som er en type lang kodende RNA, fungerte sikkert og effektivt i et større spekter av mennesker under COVID-19. Andre lange kodende RNAs, som selvforsterkende RNA (saRNA) og sirkulær mRNA (circRNA), viste også effektivitet i forklinske og kliniske studier.
Storskala produksjon av lang-kodende RNA avhenger av in vitro-transkripsjon (IVT) gjennom flere enzymatiske reaksjoner. Stegene i RNA-produksjonen inkluderer forberedelse av mal-DNA, IVT RNA-syntese, sirkulasjon, DNA-fjerne, RNA-modifisering (topping og haling) og RNA-rengjøring.
Det finnes flere nøkelenzymer som brukes i produksjonen av lang kodende RNA (f.eks. mRNA, saRNA og circRNA), herunder restriksjonsendonukleaser, T7 RNA-polymerase (T7 RNAP), RNase-hemmer, inorganisk pyrofosfatase, DNase I, vaccinia-toppingseenzyme og RNase R.
|
Prosess
|
Enzym
|
Funksjon
|
|
Forberedelse av mal-DNA
|
Restriksjonsendonukleaser
|
Linearisering av plasmid DNA (pDNA) for å unngå å generere lengre transkript.
|
|
IVT RNA-syntese
|
T7 RNA polymerase (T7 RNAP)
|
Bind til T7-promotoren og generer spesifikt RNA-transkript; Spiller en nøkkelrolle under IVT-reaksjonen.
|
|
RNase-hemmer, rekombinant
|
Hemmer RNase-aktivitet under IVT-reaksjon.
|
|
Pirofosfatase, inorganisk (iPPase)
|
Forhindre pirofosfat under IVT-reaksjon.
|
|
Fjerne DNA
|
DNase I
|
Fjern DNA-mal.
|
|
RNA-modifisering
|
Vaccinia-dekkingsenzyme
|
Legg til Cap1-strukturer på 5′ endene av IVT-mRNA.
|
|
2’-O-Methyltransferase
|
| circRNA-forsterkning |
RNase R |
Fordøy lineær RNA og bereiningskretet RNA. |
Yaohai Bio-Pharma tilbyr en fullført CDMO-løsning for enzym
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
