Cellebaserte potensanalyser
Betydningen av mRNA-styrkeanalyse
Med den raske utviklingen av mRNA-vaksiner og terapeutika, er det nødvendig med et spesifikt panel med analysemetoder for å teste styrken (definere deres biologiske aktivitet), som involverer translasjonseffektiviteten til mRNA. Disse metodene er vanligvis basert på celletransfeksjon og funksjonelle analyser av målproteinet.
Yaohai Bio-Pharma tilbyr cellebaserte potensanalyser for mRNA-legemiddelstoffer eller LNP-produkter, inkludert celletransfeksjon (293T, HepG2, HeLa, K562, U937, Raw264.7 celler, etc.) og ELISA eller Western Blotting (WB) analyser.
Regulatoriske krav for potensanalyser
I henhold til WHOs regulatoriske betraktninger, "styrken til hvert parti av den endelige vaksinen bør bestemmes ved hjelp av en passende kvantitativ og validert funksjon(er). Potensielle in vitro potensanalyser kan inkludere cellebaserte transfeksjonssystemer eller cellefrie analyser." Og USP anbefalte en "cellebasert analyse" for å teste styrken til mRNA, dvs. uttrykk for målproteinet.
Analytisk metode
|
Analyse
|
Metoder
|
|
Potensanalyser
|
Cellebasert transfeksjon og målprotein identifiserer:
293T, HepG2, HeLa, K562, U937, Raw264.7 celler, etc.
|
Prosedyre
Trinn 1. Cellebasert transfeksjon med mRNA eller mRNA-LNP
Cellene dyrkes og transfekteres med mRNA eller mRNA-LNP. I detalj blir mRNA transfektert etter å ha blitt blandet med et transfeksjonsreagens, mens mRNA-LNP transfekteres direkte inn i cellene. Etter 24-48 timer, klargjør supernatanten som inneholder det uttrykte proteinet ved sentrifugering.
Trinn 2. Funksjonelle analyser av målproteinet
Utfør ELISA- eller WB-analyser for å vurdere den funksjonelle bindingen til målproteinene.
case Study
Cellebaserte potensanalyser av mRNA-prøver
Yaohai-BioPharma har utviklet cellebasert potensanalysemetode for mRNA, som involverer cellekultur, celletransfeksjon og proteinfunksjonelle analyser. Vi transfekterte eGFP mRNA, mCherry mRNA, luciferase mRNA, spike protein mRNA inn i 293T celler, og oppdaget målprotein gjennom fluorescens, luminescerende eller farget signal, WB, ELISA.
Cellebaserte potensanalyser av mRNA-produkter av Yaohai Bio-Pharma
NO
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
