Grunnlaget for innkapsling er design og utvikling av leveringssystemet. Et godt designet leveringssystem lar circRNA-molekyler komme inn i kroppen uten å bli nedbrutt av RNA-enzymer og deretter effektivt leveres til målstedet, krysse cellemembranen og frigjøres intracellulært.
Lipid nanopartikler (LNP) er det beste leveringssystemet som er tilgjengelig, med fordeler i innkapsling, in vivo ekspresjon og in vivo sikkerhet sammenlignet med andre leveringssystemer. LNPer med nukleinsyrefragmenter svelges lett inn i celler og danner intracellulære legemer. Når det kommer inn i cellen, protonerer det sure miljøet i den intracellulære kroppen og positivt lader hodet til det ioniserte lipidet, og smelter dermed sammen med den indre membranen til den intracellulære kroppen og frigjør målnukleinsyren inn i cellen for handling.
Yaohai Bio-Pharma circRNA-tjenesten fortsetter å forbedre seg og kan tilby circRNA-LNP-innkapslingstjeneste for å optimalisere relevante kritiske prosessparametere og forbedre konsistensen og reproduserbarheten til circRNA-medisinproduksjonen.
Prosess | Tjenestedetaljer | Leveringsperiode (dag) | leveransen |
circRNA-LNP-innkapsling | Materiale og flytende forbehandling | 2 | circRNA-LNP medikamentprodukt (DP) |
Mikrofluidisk enhetsblanding | |||
Tangentiell strømningsfiltrering | 1 | ||
Steriliserende filtrering | |||
circRNA-LNP kvalitetskontroll | Innkapslingseffektivitet | 1 | Testrapport |
Partikkelstørrelse og polydispersitetsindeks | |||
Zeta-potensial |
Rask syntese, høy FoU-effektivitet og forhåndsoptimaliserte løsninger;
Innkapslingsforholdet kan nå mer enn 90%;
Størrelsen på lipidnanopartikler kan kontrolleres ved å endre væskeinjeksjonshastigheten og -forholdet;
circRNA-LNP-produkter valideres ved in vitro celleekspresjon og kan uttrykke målproteinet effektivt.
LNP-eGFP circRNA-prøver prepareres og de forskjellige dosene av dem (1 ug, 2 ug og 4 ug) transfekteres direkte inn i 293T-celler for å bekrefte om de kan uttrykke målproteinet. Etter 48 timer med transfeksjon kan et klart fluorescerende signal observeres, og det er en dose-eskalerende effekt av fluorescensintensitet.
Lipo-circ_eGFP, som består av liposom og uinnkapslet eGFP circRNA tas som en kontroll.