Betydningen av strekningsscreening
Screening av egnete vertshoster er nødvendig for CMC-utviklingen av biologiske stoffer, noe som avgjør kvaliteten og konsekvensen på produktet og produserte prosesser. Den direkte målsætningen med vertsscreening er å levere et kandidat hovedcellebank (PCB), med høy uttrykksnivå og høy stabilitet både når det gjelder passagesikkerhet og lagringsstabilitet. Valg av egnet vert er nødvendig av to hovedgrunner:
- For det første, å velge den mikrobielle verten med høy uttrykksnivå. Det finnes flere kommersielle strenger som brukes til å uttrykke ulike typer proteiner, som giftige proteiner, løselige proteiner eller eukaryotiske proteiner.
- For det andre, å skjerme verten med genetisk stabilitet. Testing av genetisk stabilitet er et nøkkelpunkt gjennom hele produksjonsløpet. Det anbefales at høy genetisk stabilitet aksepteres som en annen nøkkelkarakteristikk for passende strekk.
Nøkkelord: utvalg av mikrobielle strekk, skjerming av mikrobielle strekk, høydeknivskjerming av bakterier eller gjerder, skjerming av høyproduksjonstrekk, skjerming av høygradig stabilt strekk, skjerming av genetisk stabilt strekk Anvendelse: menneskelig medisin, dyremedisin, vaksiner, syntetisk biologi, rekombinante store molekylære biologiske stoffer, biologiske reaktanter
Strekskjermingservices fra Yaohai Bio-Pharma
Med mer enn 10 års erfaring innen CDMO i mikrobielle biologiske produkter, støtter vi utviklingen og produksjonen av ulike store molekyler, inkludert rekombinante subenhevaksiner, virusliknende partikler (VLP), hormoner (insulin, GLP-1, veksthormon), sitokiner (Interleukin-2/IL-2, IL-15, IL-21), vekstfaktorer (EGF, FGF, NGF), nanobodyer/Single-domain antibodies (sdAbs), enzymer, osv.
Vi har akkumulert rike erfaringer i valget av ulike typer plasmidvektorer og mikrobielle vertshosts, inkludert bakterier Escherichia coli (E. coli), og gjerst Pichia pastoris (P. pastoris), Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae), Hansenula polymorpha (H. polymorpha). Vi kan finne det beste uttrykksystemet for dine unike biologiske produkter.
Vi har samlet inn ulike mikrobielle vertshoster med klare kilder og standard CoA, inkludert E.Coli uttrykk og gjermeuttrykk.
Tjenestedytninger
Tjenester
|
Tjenestedytninger
|
Minimumstidslinje/dag
|
Leveringsvarer
|
Strain-bygging (E. coli)
|
Plasmidtransformasjon (flertydige vertener)
|
5
|
COA for kommersielle vertener Rapport om strain-bygging
|
PCR-verifisering
|
Strain-renhet
|
Strain-bevaring
|
Strain-bygging (gjær)
|
Forberedelse av kompetente gjær-celler
|
10
|
Plasmidlinearisering
|
Elektrotransformasjon
|
Motstand/næringsmangelskjermetning
|
Strain-renhet
|
Strain-bevaring
|
Egnelig vertsskjerming
|
Plasmid eller genom DNA-ekstraksjon
|
15-20
|
Vertsskjermingsprosess COA for konstruerte streiner
|
PCR-verifisering, restriksjonsenzymfordeling
|
Målgensekvensering
|
Skjerming av høyuttrykksvertener
|
Skjerming av vertener med genetisk stabilitet
|
Strain-bevaring
|
Casestudie
En egnelig vert forbedrer proteinet uttrykknivå med 2,5 ganger.
Vi er oppdraget til å utvikle høyproduksjonsgenererende E. coli stamme. Og vi prøvde tre typer kommersielle E. coli vertshoster, basert på egenskapene til målproteinet. Det vises at stammen S1-1 og S1-2 (Fig A: Stipe 1,2) forbedret proteinnivået til 3,5 ganger mer enn kundens opprinnelige stamme (Fig A: Stipe 3).
I tillegg viste stammen S1-1 høy genetisk stabilitet (Fig B), og den ble kjent som kandidatstamme for primær cellebank (PCB).

Vores Tjenester Karakteristikk
Dokumentert ekspertise med ulike mikrobielle vertshoster, f.eks., E. coli DH5α, TOP10, Trans10, BL21; P. pastoris SMD1168H, X-33, GS115, PichiaPink strain1/2/3/4; S. cerevisiae og H. polymorpha .
Vi har erfaring med E. coli periplasmisk sekretion, løselig og inklusjonslegems-uttrykk, samt gjerme intracellulært eller sekretions-uttrykk. Vi bruker ingen antibiotika eller bruker antibiotika under regulativ veiledning.
Vi etablerer et høy gjennomføringsrate skjeringsplattform for å skjerme ut høyproduksjon og stabile streiner fra over ett hundre kandidatstreiner.
Det garanteres at prosessen med streinoppbygging og skjerming er sporbar, under den gode data- og registerhåndtering.