Yaohai Bio-Pharma tilbyr N-terminal sekvenstesting og dataanalysetjenester basert på væskekromatografi-massespektrometri (LC-MS) eller Edman-nedbrytningsmetoden, som lar deg bestemme aminosyrene ved de respektive endepunktene av protein av interesse. N-terminal modifikasjon kan også analyseres med LC-MS.
Vi har vært involvert i proteinstrukturkarakterisering av forskjellige store molekyler, inkludert rekombinante underenhetsvaksiner, nanostoffer/VHHs/ enkeltdomene antistoffer (sdAbs), antistofffragmenter, hormoner/peptider, cytokiner, vekstfaktorer (GF), enzymer, kollagener, etc.
Regulatoriske krav for N-terminalsekvensering
I henhold til ICH Q6B-retningslinjene, er det nødvendig å bekrefte sekvensen til proteinet ditt og undersøke termini for eventuelle variasjoner som kan eksistere.
N terminalsekvenseringsmetoder
Analyse |
Metode |
N-terminal sekvensering |
Edman-degradering, væskekromatografi-massespektrometri (LC-MS) |
prosedyrer
LC-MS
1. Protein N-terminal fluorescerende merking
2. Flere fordøyelser
3. LC-MS/massespektrometri (MS) analyse
Edman fornedrelse
1. Sodium Dodecyl Sulfate (SDS) gelelektroforese av målproteinet ditt
2. Overfør gel til polyvinylidenfluorid (PVDF)-membraner og farging
3. Identifiser og kutt målproteinbåndet
4. Edman-sekvensering av N-terminus
5. Dataanalyse