Tilpasset saRNA Syntese
Selv-forsterkende mRNA (saRNA), også kjent som replicon RNA, koder for in vitro-transkription (IVT) mRNA-sekvenser og virus-replicase-gener av alphavirus eller flavivirus-opprinnelse. Virus-replicase-gener tillater selv-forsterkingen av mRNA-en, noe som fører til økt proteinekspresjon og en minimumskrevd dose RNA i forhold til ikke-forsterkende mRNAs. En annen aspekt er at saRNA er en relativt stor molekyl (mer enn 14 kb).
Yaohai Bio-Pharma har etablert en rekke mRNA-synteseteknologier for å tilby ikke-forsterkende mRNA og selv-forsterkende mRNA (1000 nt~14000 nt), som f.eks. sekvensdesign og -optimalisering, IVT, renasjon, lyofilisering og lipid nanopartikkel (LNP)-inkapsling. Alle produkter frigjøres under strikte kvalitetskontrollstandarder.
Fig.1 Strukturelle trekk ved IVT mRNAs: Konvensjonell, sirkulær og selv-forsterkende mRNA.
Sekvens-trekk ved selv-forsterkende mRNA
Selvforsterkende RNA består av fire ikke-strukturelle proteiner (betegnet som nsP1, nsP2, nsP3 og nsP4), som er derivert fra alphavirusser, spesifikt venezuelansk ekvint encefalitt-virus (VEEV). Blant disse viser nsP1 to enzymatiske aktiviteter, nemlig GTase og N7MTase, mens nsP2 har RTPase-aktivitet, som er avgjørende for å sette på kapet på IVT-mRNA for å generere Cap 0-strukturen. Dessuten fungerer nsP2 som en protease og helikase, noe som letter den komplekse prosesseringen av hele nsP-komplekset. Den nøyaktige funksjonen til nsP3 er fortsatt ukjent, men det interagerer med ulike vertssellproteiner, dermed bidrar til å dempe den antivirale responsen som opprettes av verten.
En alphavirus subgenomisk promotor (SGP)-region ligger før gen av interesse (GOI). SGP-elementet letter oppstarten av GOI-transkripsjon ved å hoppe over lesingen av sekvensen som kodder virale nsP-proteiner.
Fig.2 Syntese og celleprøver av eGFP saRNA fra Yaohai Bio-Pharma RNASci Platform.
Tilpassede løsninger av saRNA
Synteseprotokollen for saRNA er lik mRNA: Tilpasset mRNA-syntese
- Sekvensdesign
- Plasmidmallopplagring
- in vitro transkripsjon (IVT)
- mRNA enzymatisk dekkning
- mRNA Medtranskripsjonskapning
- mRNA Renhetstesting
- mRNA Lyofilisering
- LNP Inkapsling
- Analyse og testing
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
