I henhold til den sentrale dogmen er messenger RNA (mRNA) broen for overføringen av genetisk materiale fra DNA til proteiner.
mRNA spiller en biologisk rolle ved å kodere proteiner in vivo, og moden mRNA i eukaryotiske organismer består av fem komponenter: 5' Cap (toppstruktur), 5' UTR (ikke-kodende region), ORF (åpen lesningsramme), 3' UTR og 3' polyA-hale (polyadenylat hale).
Tjenester detaljer
| Prosess |
Valgfritt tjeneste |
Tjenestedytninger |
Leveringsperiode (Dager) |
| design og optimering av mRNA-sekvens |
Design og optimering av kodesekvenser |
CDS sekvensjustering
CDS codon-optimering
|
1 |
| Design og optimering av ikke-kodende sekvenser |
5' UTR sekvensdesign og -optimering
3' UTR sekvensdesign og -optimering
polyA-sekvensdesign og -optimering
|
1-2 |
Tilpassbare alternativ
| 5' UTR/3' UTR |
- Natur UTR sekvens
- Mutant/Ingeniørfremmet UTR sekvens
|
| 3' PolyA hale |
- 100A ~120A Hale (anbefalt)
- Segmentert polyA hale
- Annet tilpasset hale
|
Vanlige strategier for mRNA-sekvensdesign
| mRNA-komponenter |
Biologiske funksjoner |
Optimeringsstrategier |
| 5’ Kappe |
Beskytte mRNA mot degradering av exonukleaser og virke sammen med polyA-halen på 3'-enden, polyA-bindingsprotein og translasjonsinitieringsfaktorprotein for å initiere proteintranslasjon. |
Den naturlige Cap1-strukturen unngår mønnerkjenningsreseptorer og reduserer dermed den naturlige immunresponsen, noe som kan oppnås ved én-trinns co-transkripsjonell topping eller to-trinns enzymatisk topping [se mRNA enzymatisk topping og co-transkripsjonell topping for flere detaljer]. |
| 5’ UTR |
5' UTR kan gjenkjennes av ribosomer, regulere oversettelsen av mRNA og påvirke stabilheten til mRNA. |
Inneholder Kozak-sekvenser uten en veldig stabil sekundærstruktur. Naturlige UTR'er fra høyuttrykte gener foretrekkes for in vitro transkripsjons (IVT) mRNA, som α-globin og β-globin. |
| CDS |
Proteinkodende regioner og kodesekvenser for antigener, antistoffer eller andre funksjonelle proteiner. |
Kodonoptimalisering øker oversettelsesnivået, med merknad om at noen ikke-optimale kodoner kanskje spiller en rolle i proteinfolding. |
| 3’ UTR |
Regulerer mRNA-oversettelse og stabilhet. |
Naturlige UTR'er fra høyuttrykte gener foretrekkes for IVT mRNA, som α-globin og β-globin. |
| 3’ polyA-hale |
Regulerer protekteinuttrykk og beskytter kap-strukturen mot nedbryting. |
Nødvendig lengde (100-150 bp); å kodere polyA-hale på transkripsjonstemplatplasmidet sikrer en mer definert polyA-halelengde. |
Våre funksjoner
- Diversifisert UTR kildevalg
Flere kilder av naturlige & modifiserte UTR-biblioteker med høy uttrykksnivå; moden UTR-modifiseringsstrategi;
- Framgangsmessig CDS-optimeringsgruppe
Samarbeider med et profesjonelt AI-algoritme-team for å fullføre optimeringen av kodoner.
Legger til polyA-sekvenser etter DNA-templetter for å kontrollere mRNA-lengden mer nøyaktig.
- Diversifiserte optimeringskombinasjoner
Når effektiv uttrykk av mRNA med lav immunogenitet.
Casestudie
Sekvensdesign av en dobbel-rapportør mRNA: mCherry-eGFP mRNA
Yaohai Bio-Pharma’s mRNA-tjeneste oppgraderes kontinuerlig med design og optimalisering av en dobbel rapportørgen tandemsekvens, som oppnår ko-uttrykk av to gener.
Ved bruk av et konventionelt transfeksjonsmiddel, transfekteres den doble gen tandemsekvensen mCherry-eGFP mRNA i 293T-celler, og to fluoreserende signaler fra mCherry (rød) og forsterket grønn fluoreserende protein (eGFP) detekteres med samtidig uttrykk etter 48 timer, og lagret graf er fremhevet i gult.
Uttrykk av mCherry-eGFP mRNA i 293T-celle
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
