I følge det sentrale dogmet er messenger RNA (mRNA) broen for overføring av genetisk materiale fra DNA til proteiner.
mRNA spiller en biologisk rolle ved å kode proteiner in vivo, og modent mRNA i eukaryote organismer består av fem komponenter: 5' Cap (cap struktur), 5' UTR (ikke-kodende region), ORF (åpen leseramme), 3' UTR , og 3' polyA hale (polyadenylat hale).
Tjenestedetaljer
| Prosess |
Valgfri tjeneste |
Tjenestedetaljer |
Leveringsperiode (dag) |
| mRNA-sekvensdesign og -optimalisering |
Design og optimalisering av kodesekvenser |
CDS-sekvensjustering
CDS kodonoptimalisering
|
1 |
| Design og optimalisering av ikke-kodende sekvenser |
5' UTR-sekvensdesign og optimalisering
3' UTR-sekvensdesign og optimalisering
polyA sekvensdesign og optimalisering
|
1-2 |
Tilpassbare alternativer
| 5' UTR/3' UTR |
- Natur UTR-sekvens
- Mutant/konstruert UTR-sekvens
|
| 3' PolyA hale |
- 100A ~120A hale (anbefalt)
- Segmentert polyA hale
- Andre tilpassede hale
|
Vanlige strategier for mRNA-sekvensdesign
| mRNA-komponenter |
Biologiske funksjoner |
Optimaliseringsstrategier |
| 5' Cap |
Beskytt mRNA fra nedbrytning av eksonukleaser og opptre i samspill med polyA-halen i 3'-enden, polyA-bindende protein og translasjonsinitieringsfaktorprotein for å initiere proteintranslasjon. |
Den naturlige Cap1-strukturen unngår mønstergjenkjenningsreseptorer og reduserer dermed den naturlige immunresponsen, som kan oppnås ved ett-trinns co-transkripsjonell kapping eller totrinns enzymatisk kapping [se mRNA-enzymatisk kapping og co-transkripsjonell kapping for detaljer]. |
| 5' UTR |
5' UTR kan gjenkjennes av ribosomer, regulere translasjonen av mRNA og påvirke stabiliteten til mRNA. |
Inneholder Kozak-sekvenser uten en veldig stabil sekundærstruktur. Naturlige UTR-er av høyt uttrykte gener er foretrukket for in vitro-transkripsjon (IVT) mRNA som α-globin og β-globin. |
| CDS |
Proteinkodende regioner og kodende sekvenser for antigener, antistoffer eller andre funksjonelle proteiner. |
Kodonoptimalisering øker translasjonsnivået, og bemerker at visse ikke-optimale kodoner kan spille en rolle i proteinfolding. |
| 3' UTR |
Reguler mRNA-translasjon og stabilitet. |
Naturlige UTR-er av høyt uttrykte gener er foretrukket for IVT-mRNA som α-globin og β-globin. |
| 3' polyA hale |
Regulerer proteinekspresjon og beskytter kapselstrukturen mot nedbrytning. |
Tilstrekkelig lengde (100-150 bp) kreves; koder for polyA-hale på transkripsjonsmalplasmidet sikrer en mer definert polyA-halelengde. |
Våre funksjoner
- Diversifisert UTR-kildevalg
Flere kilder til høyt uttrykte naturlige og modifiserte UTR-biblioteker; moden UTR modifikasjonsstrategi;
- Banebrytende CDS-optimaliseringsteam
Samarbeid med et profesjonelt AI-algoritmeteam for å fullføre optimaliseringen av kodoner.
Legg til polyA-sekvenser i henhold til DNA-maler for å kontrollere mRNA-lengden mer presist.
- Diversifiserte optimaliseringskombinasjoner
Oppnå effektiv ekspresjon av mRNA med lav immunogenisitet.
Case study
Sekvensdesign av et mRNA med dobbel reporter: mCherry-eGFP mRNA
Yaohai Bio-Pharmas mRNA-tjeneste fortsetter å bli oppgradert med design og optimalisering av en dobbel reportergen-tandemsekvens, som oppnår samuttrykk av doble gener.
Ved å bruke et konvensjonelt transfeksjonsreagens blir den doble gen-tandemsekvensen mCherry-eGFP mRNA transfektert inn i 293T-celler, og to fluorescerende signaler av mCherry (rødt) og forsterket grønt fluorescerende protein (eGFP) detekteres med samtidig ekspresjon etter 48 timer, og stablet grafen er uthevet i gult.
Ekspresjon av mCherry-eGFP mRNA i 293T-celle
NO
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
