Produktene oppnådd ved in vitro cyclization og RNase R berikelse krever ytterligere fjernet fra in vitro transkripsjon (IVT), inkludert ukonsumerte substrater i cyclization reaksjon, reaksjon biprodukter og nicked RNA.
Yaohai Bio-Pharma har moden LiCl-utfelling, magnetisk perlerensing, egenutviklet rensing og andre diversifiserte renseløsninger for effektivt å fjerne ulike urenheter og tilberede svært rent circRNA.
Renseløsning for små mengder circRNA for celletransfeksjon og som del av dyreforsøk.
Renseløsning for små mengder circRNA for celletransfeksjon og som en del av dyreforsøk.
Applikasjonsscenarier med høyere kvalitet;
Stabil og skalerbar renseprosess for å møte GMP-produksjonskrav.
Prosess | Valgfri tjeneste | Tjenestedetaljer | Leveringsperiode (dag) | leveransen |
circRNA-rensing | Konvensjonell renseløsning | Litiumkloridutfelling | 1 | circRNA medikamentsubstans |
Magnetisk perlerensing | ||||
Svært ren circRNA-rensing | Preparativ væskekromatografi med høy ytelse (HPLC) | 1-2 | ||
Bufferutveksling | Ultrafiltrering | 1 | ||
circRNA kvalitetskontroll | Konsentrasjon /rens | Ultrafiolett (UV) spektrofotometri | 0.5 | Testrapport |
Purity | Agarosegelelektroforese (AGE)/E-gel | |||
HPLC-valgfritt | 1 |
Applikasjonsscenarier kan oppnås.
circRNA med en renhet på mer enn 90%;
Gjennom streng kontroll av RNaser i det eksperimentelle miljøet og forbruksvarer, forhindres RNA-nedbrytning effektivt.
Yaohai Bio-Pharma har etablert en moden circRNA-renseløsning som effektivt kan fjerne ulike prosessrelaterte urenheter.
De sirkulære RNA-produktene renset med den konvensjonelle løsningen er fortsatt åpenbart blandet med hakket RNA og introner.
Etter renseløsningen utviklet av Yaohai Bio-Pharma, kan forskjellige lineære RNA-urenheter, slik som hakket RNA og introner, med hell fjernes.
circRNA ekspresjonsvalidering
Ved å bruke et konvensjonelt liposom blir renset eGFP circRNA transfektert inn i 293T-celler, og et fluorescenssignal observeres etter 24 timer og fortsetter å bli forbedret etter 48 timer. Fluorescenssignalet kan fortsatt påvises på den 7. dagen og den 14. dagen etter transfeksjonen.