Biologiske råstoff er komplekse store molekyler, spesielt følsomme for miljøfaktorer: temperatur, oksidasjon, lys, joninnhold og skjær. Det er avgjørende å gjennomføre stabilitetsstudier på både råstoff og ferdig produkt under planlagte lagringsbetingelser, akselererte betingelser og tvungne nedbrytningsbetingelser. Stabilitetsdata brukes vanligvis til å støtte holdbarhetstiden, utløpsdatoen og lagringsbetingelsene.
I overensstemmelse med ICH Q5C-veiledningen tilbyr Yaohai Bio-Pharma stabilitetsstudietjenester for proteiner, peptider, plasmider og mRNA, som omfatter langtidsstabilitetsstudier, akselererte stabilitetsstudier og tvungne nedbrytningsstudier. I tillegg har vi alle nødvendige evner for prøvelagring og analyse av Kritiske Kvalitetsattributter (CQA) for å samle inn stabilitetsdata.
Regulativ krav for stabilitetsstudier
I henhold til ICH Q5C-retningslinjene, «De nødvendige støttende stabilitetsdata bør utvikles for bioteknologiske/biologiske produkter, ettersom mange eksterne vilkår kan påvirke produktets virkestoff, renhet og kvalitet. Det anbefales også sterkt at studier gjennomføres på legemidlet og produkter under akselererte og stresevilkår.
Ekte-tids (langtids) stabilitetsstudier
I ekte-tids (langtids) stabilitetsprøving lagres legemidlet eller produktet under de planlagte lagringsbetingelsene og overvåkes inntil de biologiske egenskapene endrer seg utenfor de akseptable grensene. Som resultat av langtidsstabilitetsstudier kan holdbarhetstiden, utløpsdatoen, lagringsbetingelsene og prøvetakings/testintervallene fastsettes.
Tabell 1. Prøvefrekvensen i langtidsstabilitetsstudier av biologiske produkter før godkjenning
| Haldbarhetstid |
Prøveintervaller |
Tidspunkt |
| 1 år eller mindre |
Månedlig de første 3 månedene;
Hver 3. måned deretter
|
På 0, 1, 2, 3, 6, 9 og 12 måneder |
| Mer enn 1 år |
Hver 3. måned i det første året;
Hver 6. måned i det andre året;
Årlig deretter
|
På 0, 3, 6, 9, 12, 18, 24, 36 måneder, og årlig deretter |
Akselererte stabilitetsstudier
Den anbefalte lagringstemperaturen for injeksjonsbare biopharmaceutika er vanligvis mellom 2 og 8℃. Akselererte stabilitetsstudier gjøres med kortere varighet under akselererte forhold, som høy temperatur. Stabilitetsdataene akzepteres som støtteinformasjon for produktstabilitet og brukes bredt i bestemmelsen av holdbarhet og utløpsdato, samt i formuleringsutvikling.
Tabell 2. Eksempler på akselererte stabilitetsstudier
| Stabilitetsstudier |
Akselererte forhold |
Prøvetakingspunkter |
| Akselererte stabilitetsstudier |
økt temperatur
relativ fuktighet
|
På 0, 1, 2, 3, 6 måneder |
Tvinget Degradasjonstudier
Målet med tvinget degradasjonstudier er å samle stabilitetsinformasjon under stressforhold, som høy temperatur, fuktighet, lys, oksidasjon, freeze-thaw eller mekanisk stress (rysting, shear). Tvinget degradasjon av legemiddelstoffet eller ferdigproduktet under ekstreme forhold kan hjelpe til å oppdage nøkkel faktorer/parametere som fører til degradasjon av biologiske stoffer. Disse dataene er nyttige for vurdering av robusthet i formulerings- og produksjonsprosessen.
Tabell 3. Eksempler på Tvinget Degradasjonstudier
| Stress |
Stressforhold |
Varighets tid |
| Temperatur |
Høy temperatur (f.eks., 25℃, 30℃, 37℃, 40℃) |
Dager-måneder |
| Fuktighet |
Relativ fuktighet (0~100%) |
Dager-måneder |
| Lys |
Et minimum av 1,2 millioner lx h og 200 W h/m2 |
Flere dager |
| Fross-fryse |
fross–fryse (fra -20℃, -80℃ til 15℃) |
1~5 sykler |
| Risting, røring |
50~500 omd./min |
Timer-dager |
Analytiske metoder som støtter stabilitetsstudier
| Kritiske kvalitetsattributter (CQAs) |
Analytiske metoder |
| Totalt proteinnivå |
UV, BCA, Bradford, Lowry |
| Synlige partikler |
Visuell inspeksjon |
| Aggregering, fragmenter |
Dynamisk lysstreu Størrelsesekskluderende kromatografi (SEC) HPLC/UPLC, Kapillær-elektroforese CE (CGE, CZE, cIEF/iCIEF), Ikke-reduksjonssensitiv SDS-PAGE |
| Peptidkartlegging og sekvensiering |
LC-MS/MS |
| Disulfidbindinger |
LC-MS/MS |
| PTM (oksidasjon, isomerisering, deamidering, glykosylering) |
LC-MS/MS |
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
