Biologiske legemiddelstoffer er komplekse store molekyler, spesielt følsomme for miljøfaktorer: temperatur, oksidasjon, lys, ioneinnhold og skjærkraft. Det er avgjørende å gjennomføre stabilitetsstudier på legemiddelstoffet og legemiddelproduktet under tiltenkte lagringsforhold, akselererte forhold og forsert nedbrytningsforhold. Stabilitetsdataene brukes vanligvis for å støtte holdbarhet, utløpsdato og lagringsbetingelser.
Etter ICH Q5C-veiledningen tilbyr Yaohai Bio-Pharma stabilitetsstudietjenester for proteiner, peptider, plasmider og mRNAer, som involverer langsiktige stabilitetsstudier, akselererte stabilitetsstudier og tvungen nedbrytningsstudier. I tillegg har vi alle nødvendige muligheter for prøvelagring og Critical Quality Attributes (CQA)-analyse for å samle inn stabilitetsdata.
Regulatoriske krav til stabilitetsstudier
I følge ICH Q5C-retningslinjen, "Riktig støttestabilitetsdata bør utvikles for bioteknologiske/biologiske produkter, da mange ytre forhold kan påvirke produktets styrke, renhet og kvalitet. Det anbefales også sterkt at det utføres studier på legemiddelstoffet og legemiddelproduktet under akselererte og stressforhold.
Sanntids (langsiktig) stabilitetsstudier
I sanntids (langsiktig) stabilitetstesting, lagres legemiddelstoffet eller legemiddelproduktet under tiltenkte lagringsforhold og overvåkes til de biologiske egenskapene endres utover akseptable grenser. Som et resultat av langtidsstabilitetsstudier kan holdbarhet, utløpsdato, lagringsforhold og prøvetakings-/testingsintervaller fastsettes.
Tabell 1. Testfrekvensen i langtidsstabilitetsstudier av forhåndsgodkjente biologiske midler
| Holdbarhet |
Testintervaller |
Tidspunkter |
| 1 år eller mindre |
Månedlig de første 3 månedene;
Hver tredje måned deretter
|
Ved 0, 1, 2, 3, 6, 9 og 12 måneder |
| Mer enn 1 år |
Hver 3. måned det første året;
Hver 6. måned det andre året;
Årlig deretter
|
Ved 0, 3, 6, 9, 12, 18, 24, 36 måneder og deretter årlig |
Akselererte stabilitetsstudier
Den anbefalte lagringstemperaturen for injiserbare biofarmasøytiske midler er vanligvis mellom 2 og 8 ℃. Akselererte stabilitetsstudier utføres med kortere varighet under akselererte forhold, for eksempel høy temperatur. Stabilitetsdataene er anerkjent som støttende informasjon for produktstabilitet og mye brukt i fastsettelse av holdbarhet og utløpsdato, samt formuleringsutvikling.
Tabell 2. Eksempler på akselererte stabilitetsstudier
| Stabilitetsstudier |
Akselererte forhold |
Prøvetakingspunkter |
| Akselererte stabilitetsstudier |
forhøyet temperatur
Relativ fuktighet
|
Ved 0, 1, 2, 3, 6 måneder |
Tvunget degraderingsstudier
Målet med studier av tvungen nedbrytning er å samle stabilitetsinformasjon under stressforhold, som høye temperaturer, fuktighet, lys, oksidasjon, fryse-tine eller mekanisk stress (risting, skjærkraft). Tvunget nedbrytningsstudier av legemiddelstoffet eller legemiddelproduktet under ekstreme forhold kan bidra til å gjenkjenne nøkkelfaktorer/parametre som fører til biologisk nedbrytning. Disse dataene er nyttige for robusthetsvurdering for formulerings- og produksjonsprosessen.
Tabell 3. Eksempler på studier av tvungen degradering
| Stress |
Stressforhold |
Varighetstid |
| Temperatur |
Høy temperatur (f.eks. 25 ℃, 30 ℃, 37 ℃, 40 ℃) |
Dager-måneder |
| Luftfuktighet |
Relativ fuktighet (0~100%) |
Dager-måneder |
| Lett |
Minimum 1.2 millioner lx t og 200 W t/m2 |
Flere dager |
| Frys-tine |
frys-tine (fra -20 ℃, -80 ℃ til 15 ℃) |
1~5 sykluser |
| Risting, røring |
50 ~ 500 o / min |
Timer-dager |
Analytiske metoder som støtter stabilitetsstudier
| Kritiske kvalitetsattributter (CQA'er) |
Analytiske metoder |
| Totalt proteininnhold |
UV, BCA, Bradford, Lowry |
| Synlige partikler |
Visuell inspeksjon |
| Aggregasjon, fragmenter |
Dynamisk lysspredning Størrelseseksklusjonskromatografi (SEC) HPLC/UPLC, Kapillærelektroforese CE (CGE, CZE, cIEF/iCIEF), Ikke-reduserende SDS-PAGE |
| Peptidkartlegging og sekvensering |
LC-MS/MS |
| Disulfidbindinger |
LC-MS/MS |
| PTM (oksidasjon, isomerisering, deamidering, glykosylering) |
LC-MS/MS |
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NEI
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
