Deamidering av glutamin og asparagin sidekjeder er en vanlig modifikasjon når det gjelder innvirkning på egenskapene til proteine biomedisiner. Deamidering kan oppstå i glutaminresiduer, men vanligvis på mye lavere hastighet. Deamideringshastighetene påvirkes av temperatur, pH, lokal proteinstruktur og flankeende aminosyresider.
Yaohai BioPharma tilbyr testingstjeneste for aminosyre-deamidering, som lar deg oppdage aminosyre-deamidering ved hjelp av Væskekromatografi-Massespekometri (LC-MS).
Vi har vært in involvert i Proteinstrukturkarakterisering av ulike store molekyler, inkludert Rekombinante Subenhevaksiner, Nanokropper/VHHs/Enkel-domene-antistoffer (sdAbs), Antibodyfragmenter, Hormoner/Peptider, Sytokiner, Vekstfaktorer (CF), Enzymer, Kollager etc.
Reguleringskrav for Aminosyre-deamidering
I henhold til ICH Q6B-retningslinjene kan deamiderte former oppdages og karakteriseres ved hjelp av kromatografiske, elektroforetiske og/eller andre relevante analytiske metoder.
Analytiske metoder
| Analyse |
Metoder |
| Deamidering |
Væskestykkromatografi-Massepektrometri (LC-MS) |
Prosedyrer
f.eks., aspartat-deamidering
1. Enzytmatisk fordøyning
2. LC-MS under High-Performance Liquid Chromatography (HPLC)-betingelser
3. Dataanalyse
Asparagin-deamidering skjer via en succinimid-mellomprodukt (Suc), som er følsom for rasemisering og hydrolyse, hvilket gir fire Asp-isomerer, herunder L-Asp, L-IsoAsp, D-Asp og D-IsoAsp.
Teoretisk sett kunne Gln-deamidering generere fire tilsvarende Glu-isomerer gjennom en prosess liknende Asn-deamidering.
Den høyoppløselige masseanalytoren identifiserer enkelt den 1-Da masseforskjellen mellom peptider som inneholder Asn/Gln og de tilsvarende deamiderte motparene Asp/Glu.
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
