Deamidering av glutamin- og asparaginsidekjeder er en vanlig modifikasjon når det gjelder innvirkning på egenskapene til proteinbiofarmasøytiske midler. Deamidering kan forekomme i glutaminrester, men vanligvis med en mye lavere hastighet. Deamideringshastighetene påvirkes av temperatur, pH, lokal proteinstruktur og flankerende aminoacylrester.
Yaohai BioPharma tilbyr testtjeneste for aminosyredeamidering, som lar deg oppdage aminosyredeamidering ved hjelp av væskekromatografi-massespektrometri (LC-MS).
Vi har vært involvert i proteinstrukturkarakterisering av forskjellige store molekyler, inkludert rekombinante underenhetsvaksiner, nanostoffer/VHHs/ enkeltdomene antistoffer (sdAbs), antistofffragmenter, hormoner/peptider, cytokiner, vekstfaktorer (CF), enzymer, kollagener, etc.
Reguleringskrav for aminosyredeamidering
I henhold til ICH Q6B-retningslinjene kan deamiderte former påvises og karakteriseres ved kromatografiske, elektroforetiske og/eller andre relevante analysemetoder.
Analytiske metoder
| Analyse |
Metoder |
| Deamidering |
Væskekromatografi-massespektrometri (LC-MS) |
prosedyrer
f.eks. asparaginsyredeamidering
1. Enzymatisk fordøyelse
2. LC-MS under High-Performance Liquid Chromatography (HPLC) tilstand
3. Dataanalyse
Asparagin-deamidering skjer via et succinimid-mellomprodukt (Suc), som er mottakelig for racemisering og hydrolyse, og gir fire Asp-isomerer, inkludert L-Asp, L-IsoAsp, D-Asp og D-IsoAsp.
I teorien kan Gln-deamidering generere fire tilsvarende Glu-isomerer gjennom en prosess som ligner på Asn-deamidering.
Den høyoppløselige massespektrometrien identifiserer enkelt 1-Da masseforskjellen mellom Asn/Gln-holdige peptider og deres tilsvarende deamiderte motstykker Asp/Glu.
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NEI
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
