Alle Kategorier
Tag-fri proteinforberedelse

Tag-fri proteinforberedelse Norge

Hjem >  Mikrobiell CDMO  >  Forskning og oppdagelse  >  Tag-fri proteinforberedelse

Tag-fri proteinforberedelse

Proteinmerker, som fusjonspartnere brukt i rekombinante DNA-teknologier, muliggjør effektiv, enkelt-trinns affinitetsrensing for ulike proteiner/peptider med ulike egenskaper. Til tross for denne viktige fordelen, kan tagger som eksogene aminosyrer endre proteinstrukturen og biologiske funksjoner. Derfor er ikke-merkede (tag-frie) proteiner eller peptider mer foretrukket for å sikre sikkerhet og effekt, spesielt innen det biofarmasøytiske feltet. Et rekombinant protein med en fusjonsmerke har begrensede muligheter for å få autorisasjon fra medisinske/legemiddeladministrasjonsorganer.

Basert på den mikrobielle biologiske FoU-plattformen, tilbyr Yaohai Bio-Pharma skreddersydde ikke-merkede (Tag-fri) proteinpreparattjenester dedikert til å møte unike mål for forskning, utvikling og produksjon for klinisk bruk.

Nøkkelord: tag-fri proteinproduksjon, ikke-merket proteinrensing, gratis tag-basert proteinpreparat, tagless protein ekspresjon og rensing, svært tag-fritt målprotein 

Anvendelse: forskning på humanmedisin, utvikling av dyremedisin, utvikling av rekombinant vaksine, produksjon av rekombinant biologiske store molekyler

Vår mikrobielle FoU-plattform

Vi har erfaring med mikrobiell stammeteknikk, fermentering og produktrensing.

Bakterie: Escherichia coli (E. coli)

Gjær: Pichia pastoris (P. pastoris), Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae), Hansenula polymorpha (H. polymorpha)

Tilpassede alternativer
Modalitet Rekombinant protein
Utgangsmaterialer Gensekvenser, rekombinant plasmid eller konstruerte stammer
leveransen Rens: >80 %, >85 %, >90 % Mengde: 0.2~10 g (bestemmes av prosjektet)
Uttrykkssystem og formasjon

E. coli periplasmatisk sekresjon, løselig og inklusjonskroppsuttrykk;

Gjær intracellulært eller sekresjonsuttrykk

Analysemetoder Ultrafiolett (UV), bicinchoninsyreanalyse (BCA), Bradford eller Lowry for kvantitet
Natriumdodecyl-sulfat polyakrylamidgelelektroforese (SDS-PAGE) for rensetesting
Valgfritt: Western blot (WB), enzymkoblet immunosorbentanalyse (ELISA), høyytelses væskekromatografi (HPLC)
Resterende urenheter Endotoksin (valgfritt)
Tjenestedetaljer

Tjenester

Tjenestedetaljer

Minimal tidslinje (arbeidsdag)

Gensyntese

Kodonoptimalisering for spesifikk ekspresjonsvert

7 ~ 10 dager

Gensyntese

Plasmid/vektorkonstruksjon

Kloning inn i plasmid/vektor

2 dager

Plasmid transformasjon

Verifikasjon av polymerasekjedereaksjon (PCR), restriksjonsenzymfordøyelse, gensekvensering

3 dager

Proteinuttrykk i E. coli

Plasmid transformasjon,

2 dager

Dyrking i ristekolbe

3 dager

7L-sacle gjæring, optimalisering

4 dager / batch

Tag-fri proteinrensing, optimalisering

5 ~ 10 dager / batch

Testing med natriumdodecyl-sulfat polyakrylamidgelelektroforese (SDS-PAGE)

Proteinuttrykk i gjær

Klargjøring av gjærkompetente celler

4 dager

Plasmidlinearisering og elektrotransformasjon

7L-sacle gjæring, optimalisering

5 dager

Tag-fri proteinrensing, optimalisering

7 dager / batch

Tag-fri proteinrensing

5 ~ 10 dager / batch

QC av SDS-PAGE

Tilleggstjenester (valgfritt)
Få et gratis tilbud

Kontakt oss