mRNA brukes bredt i studier av gener eller proteinkjerner. Samtidig er det vanlig i utviklingen av forebyggende og terapeutiske biologiske produkter. Som en vanlig syntesestrategi for RNA-molekyler lar in vitro-transkription (IVT) oss oppnå tilpassede transkripter effektivt.
Yaohai Bio-Pharma har etablert en rekke mRNA-synteseteknologier for å tilby høykvalitets RNA, som sekvensdesign og -optimalisering, IVT, renasjon, lyofilisering og lipidnanopartikkelforselling (LNP). Alle produkter frigjøres under strenge kvalitetskontrollstandarder (QC).
Med utbruddet av det COVID-19-pandemien i 2020 har mRNA-teknologien gjort store framsteg, og den relaterte forskningen og anvendelsene har oppnådd en uforutset utvikling, inkludert forebyggende vaksiner mot smittsomme sykdommer, terapeutiske kreftvaksiner og medisiner, tumsbehandling, proteinkvalifiserende behandlinger, regenerativ medisin og celle- og generapi (CGT).
mRNA-vaksine | mRNA-terapeutikk |
|
Prosess | Valgfritt tjeneste | Tjenestedytninger | Leveringsperiode (arbeidsdag) | Leveranse |
design og optimering av mRNA-sekvens | Design og optimering av kodesekvenser | CDS-sekvensdesign og kodonoptimering | 1-3 | Sekvensfil |
Design og optimering av ikke-kodende sekvenser | Design og optimering av UTR, polyA-sekvenser | |||
Forberedelse av transkripsjonstemplatplasmid | Forberedelse av rekombinant plasmid | Genesynthese | 7-10 | |
Plasmidforsterkning og -ekstraksjon | 4 | |||
Plasmidlinjarisering og -renasjon | ||||
mRNA In Vitro Transkripsjon | Ko-transkriptionell dekkning (en-trinns-metode) | In vitro transkripsjon (IVT) / Cap analog | 1-2 | N/A |
Nukleotidmodifikasjoner (UTP/CTP-modifikasjoner) | ||||
Fjerne DNA-mal (DNase I) | ||||
Enzytmessig dekkning (to-trinns prosess) | IVT | 2-3 | ||
Nukleotidmodifikasjoner (UTP/CTP-modifikasjoner) | ||||
Fjerne DNA-mal (DNase I) | ||||
mRNA-rengjøring (lithiumklorid/magnetiske partikler) | ||||
Enzytmessig dekkning | ||||
mRNA Renhetstesting | Konvensjonell rengjøringsmetode | Lithiumklorid nedsetting | 1 | mRNA medisinprodukt |
Rengjøring med magnetiske partikler | ||||
Rengjøringsskjema med kromatografi kolonne | Kombinasjon av flere kromatografimetoder | 1-2 | ||
Buffertutveksling | Ultrafiltrering | 1 | ||
mRNA Lyofilisering | Lyofilisering | Forfrysing | 2-3 | mRNA lyofilisert pulver |
Første tørring (sublimasjon) | ||||
Andre tørring (desorpsjon) | ||||
mRNA innkapsling | LNP Inkapsling | LNP Inkapsling | 2-3 | mRNA-LNP legemiddelprodukt |
Konsentrasjon og bufferutveksling | ||||
mRNA-kvalitetsanalyse | mRNA legemiddelsubstans / tørrpulver ved dehydrering | Konsentrasjon, renhet | 1 | Testavtale |
Integritet, kapslings-effektivitet, polyA-halefordeling | 2-5 | |||
mRNA-LNP legemiddelprodukt | Inkapslingsnøyaktighet | 1 | ||
Partikkelstørrelse og -fordeling | ||||
Overflate-ladning | ||||
mRNA-uttrykksvalidering | vurdering av 293T-celler | Celleplatering | 4 | |
Midlertidig transfeksjon av celler | ||||
Observasjon av fluoresenssignaler | 1-3 | |||
Western Blot (WB) / Enzym-koblet immunosorbensassay (ELISA) |
5' Cap |
▪ Uten cap ▪ Cap0, med co-cap ▪ Cap1, med co-cap ▪ Cap1, enzymatisk dekkning |
5' UTR/3' UTR |
▪ Naturlig UTR-sekvens ▪ Mutant/Designet UTR-sekvens |
3' PolyA hale |
▪ 100A ~120A hale (anbefalt) ▪ Segmentert polyA hale ▪ Andre tilpassede haler |
Modifiserte nukleosider |
▪ Umodifiserte baser ▪ Pseudouridin (Ψ) ▪ N1-Methylpseudouridin (N1Ψ) ▪ 5-methylsytosin (m5C) ▪ 5-methyluridin (m5U) ▪ 5-methoxyuridin (5moU) ▪ 2-tiouridin (s2U) ▪ 2′-O-methyl-U ▪ Andre modifikasjoner |
Integret tjenestestrøm
Tilbyr en rekke tjenester fra forhåndssekvensdesign til bakend mRNA-forberedelse, kvalitetskontroll og uttrykksvalidering.
Internasjonal kutteteknologi for sekvensdesign og optimering
Profesjonelt design og optimering av mRNA-sekvenser letter effektiv mRNA-uttrykk.
Diversifiserte nukleotidmodifikasjoner
Effektivt øker mRNA-uttrykk og reduserer ugunstige immunresponser mot mRNA.
Ferdigstillingsplattform
Ved å kombinere konvensjonelle og egendesignede rensetechnikker, får man mRNA-prover med høy rensning.
Fullstendig kvalitetskontrollplattform
Utvidede kvalitetskontrollalternativer for å møte kravene til rutinetester, som konsektrasjon, A260/280-renehet og integritet, samt høy kvalitetskontrollkrav, som effektivitet av kappling/polyA-fordeling.
Rask levering
Tilpasset mRNA kan leveres på bare 7 dager, unntatt eksterne sekvensynsprosesser.