CircRNA-forberedelse krever lineær RNA som forhåndsstoff (RNA-forhåndsstoff) for sirkulering, der RNA-forhåndsstoffet vanligvis forberedes ved å bruke lineært plasmid-DNA som transkripsjonsmal og transkriberes in vitro med hjelp av T7 RNA-polymerase.
Høykvalitets plasmid-DNA er avgjørende for in vitro-transkription (IVT). Basert på den modne plasmidforberedelsesplattformen kan Yaohai Bio-Pharma tilby et tjeneste for forberedelse av høyreinhet og standardisert lineært plasmid-DNA (pDNA) for å sikre integriteten av IVT-produkter.
Tjenester detaljer
| Prosess |
Valgfritt tjeneste |
Tjenestedytninger |
Leveringsperiode (arbeidsdag) |
| Forberedelse av sirkulær plasmid |
Genesynthese |
Genesynthese (Tredjepart) |
7-10 |
| Plasmidforstørring |
Plasmidforstørring |
2 |
| Plasmiduttrekking |
| Forberedelse av linearisert plasmid |
Plasmidlinjarisering og -renasjon |
Plasmidlinearisering |
1 |
| Renasjon av linearisert DNA |
| Kvalitetskontroll av plasmid-DNA |
Kontrastrenhet |
Ultraviolet (UV) Spektrofotometri |
1-2 |
| Plasmid konformasjon |
Agarosegelelektroforese (AGE) |
| Kapillær Elektrofose (CE) - Valgfritt |
| Plasmid identifisering |
Restriksjonsenzymeidentifisering / AGE |
Våre funksjoner
Fleksibel utvalg av lineariseringsmetoder
Optimalisering av DNA-ekstraksjon og renningsmetoder for å oppnå høye gjenvinningsrater.
Strikte prosesskontrollstandarder, med en superhelikal konformasjonsrate på plasmidprøver for forskning på over 80%.
- Modernes Platform-prosess
Høy standard og effektive tjenester for plasmidforberedelse og kvalitetskontroll for å møte eksperimentelle behov.
Casestudie
Med Yaohai Bio-Pharmas produkt mCherry circRNA som eksempel, er superkretthetsforholdet av transkripsjonstemplateplasmidprøver (forskningsgrad) mer enn 70%, med en lineariseringsrate på nærmere 100%.
mCherry circRNA forberedes med linearisert plasmid som template og transfekteres inn i 293T-celler. Et høyt nivå av fluoresensuttrykk (rød fluoresens) oppdages etter 24 timer med transfeksjon, som vil økes etter 48 timer, og kan fortsatt oppdages på den syvende og fjortende dagen etter transfeksjon.
mCherry-proteinet uttrykkes stabil og effektivt, og renheten av transkripsjonstemplaten kan oppfylle kravene til circRNA-lægemiddelprodukt (DP) av høy kvalitet.
In vitro validering av uttrykk av mCherry circRNA
NO
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
