I forberedelsesprosessen av in vitro transkripsjon (IVT) mRNA kreves linearisert plasmid-DNA som transkripsjonsmal for IVT med hjelp av T7 RNA-polymerase. Høykvalitets plasmid-DNA er avgjørende for in vitro transkripsjon.
På grunnlag av den modne plasmidforberedelsesplattformen kan Yaohai Bio-Pharma tilby en tjeneste for forberedelse av linearisert plasmid-DNA av høy rensning og høy standard for å oppnå effektiv IVT-transkripsjon.
Tjenester detaljer
| Prosess |
Valgfritt tjeneste |
Tjenestedytninger |
Leveringsperiode (arbeidsdag) |
| Forberedelse av sirkulær plasmid |
Genesynthese |
Genesynthese (Tredjepart) |
7-10 |
| Plasmidforstørring |
Plasmidforstørring |
2 |
| Plasmiduttrekking |
| Forberedelse av linearisert plasmid |
Plasmidlinjarisering og -renasjon |
Plasmidlinearisering |
1 |
| Renasjon av linearisert DNA |
| Kvalitetskontroll av plasmid-DNA |
Kontrastrenhet |
Ultraviolet (UV) Spektrofotometri |
1-2 |
| Plasmid konformasjon |
Agarosegelelektroforese (AGE) |
| Kapillær Elektrofose (CE) - Valgfritt |
| Plasmid identifisering |
Restriksjonsenzymeidentifisering / AGE |
Våre funksjoner
Fleksibel utvalg av lineariseringsmetoder
Optimalisering av DNA-ekstraksjon og renningsmetoder for å oppnå høye gjenvinningsrater.
Strikte prosesskontrollstandarder, med en superhelikal konformasjonsrate på plasmidprøver for forskning på over 80%.
- Modernes Platform-prosess
Høy standard og effektive tjenester for plasmidforberedelse og kvalitetskontroll for å møte eksperimentelle behov.
Casestudie
Med Yaohai Bio-Pharma-katalogprodukt mRNA_luciferase som eksempel, har transkripsjonstemplatet plasmidprøve (forskningsgrad) en superhelikal andel på mer enn 90%, en lineariseringsandel nær 100%, og en etterfølgende transkripsjonsandel på opp til 1:200 (linearisert plasmid DNA:mRNA).
MRNA_luciferasen som fås gjennom forberedelsen av en linearisert plasmid som mal er transfusert inn i 293T-celler, og enzym-substrate-reaksjonaktiviteten vurderes 24 timer etter transfeksjon.
En tydelig sterk luciferaseaktivitetssignal kan oppdages, dvs. at luciferaseproteinet uttrykkes effektivt, hvilket foreslår at renheten av transkripsjonsmalen fullt ut kan tilfredsstille kravet til høykvalitets mRNA-forberedelse.
Avlesning av superlanet plasmidforhold
Verifisering av luciferase mRNA-uttrykk in vitro
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
