mRNA har blitt mye brukt i studiet av gen- eller proteinfunksjoner. I mellomtiden er det vanlig i utviklingen av profylaktiske og terapeutiske biologiske midler. Som en vanlig syntesestrategi for RNA-molekyler, gjør in vitro-transkripsjon (IVT) oss i stand til å oppnå tilpassede transkripsjoner effektivt.
Yaohai Bio-Pharma har etablert et sett med mRNA-synteseteknologier for å gi høykvalitets RNA, som sekvensdesign og optimalisering, IVT, rensing, frysetørking og lipid nanopartikkel (LNP) innkapsling. Alle produktene er utgitt under strenge kvalitetskontrollstandarder (QC).
Med utbruddet av COVID-19-pandemien i 2020 har mRNA-teknologien utviklet seg med stormskritt, og dens relaterte forskning og anvendelser har fått enestående utvikling, inkludert profylaktiske vaksiner for forebygging av infeksjonssykdommer, terapeutiske onkologiske vaksiner og legemidler, tumorterapi, protein erstatningsterapi, regenerativ medisin og celle- og genterapi (CGT).
mRNA-vaksine | mRNA-terapi |
|
Prosess | Valgfri tjeneste | Tjenestedetaljer | Leveringsperiode (arbeidsdag) | leveransen |
mRNA-sekvensdesign og -optimalisering | Design og optimalisering av kodesekvenser | CDS-sekvensdesign og kodonoptimalisering | 1-3 | Sekvensfil |
Design og optimalisering av ikke-kodende sekvenser | Design og optimalisering av UTR, polyA sekvenser | |||
Transkripsjonsmal Plasmidforberedelse | Rekombinant plasmidpreparat | Gensyntese | 7-10 | |
Plasmidamplifikasjon og ekstraksjon | 4 | |||
Plasmid linearisering og rensing | ||||
mRNA in vitro transkripsjon | Co-transkripsjonsbegrensning (ett-trinns metode) | In vitro transkripsjon (IVT) / Cap analog | 1-2 | N / A |
Nukleotidmodifikasjoner (UTP/CTP-modifikasjoner) | ||||
Fjerning av DNA-template (DNase I) | ||||
Enzymatisk kapping (to-trinns prosess) | IVT | 2-3 | ||
Nukleotidmodifikasjoner (UTP/CTP-modifikasjoner) | ||||
Fjerning av DNA-template (DNase I) | ||||
mRNA-rensing (litiumklorid/magnetiske perler) | ||||
Enzymatisk kapping | ||||
mRNA-rensing | Konvensjonell renseordning | Litiumkloridutfelling | 1 | mRNA medikamentsubstans |
Magnetisk perlerensing | ||||
Renseskjema for kromatografikolonne | Kombinasjon av flere kromatografimetoder | 1-2 | ||
Bufferutveksling | Ultrafiltrering | 1 | ||
mRNA-lyofilisering | Lyofilisering | Forfrysing | 2-3 | mRNA lyofilisert pulver |
Primær tørking (sublimering) | ||||
Sekundær tørking (desorpsjon) | ||||
mRNA-innkapsling | LNP-innkapsling | LNP-innkapsling | 2-3 | mRNA-LNPDrug-produkt |
Konsentrasjon og bufferutveksling | ||||
mRNA kvalitetsanalyse | mRNA medikamentsubstans/ lyofilisert pulver | Konsentrasjon, renhet | 1 | Testrapport |
Integritet, kappeeffektivitet, polyA-halefordeling | 2-5 | |||
mRNA-LNP medikamentprodukt | Innkapslingseffektivitet | 1 | ||
Partikkelstørrelse og fordeling | ||||
Overflateladning | ||||
mRNA-ekspresjonsvalidering | 293T celleevaluering | Celleplettering | 4 | |
Forbigående transfeksjon av celler | ||||
Fluorescenssignalobservasjon | 1-3 | |||
Western blot (WB)/Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) |
5' Cap | ▪ Uten lokk ▪ Cap0, co-capped ▪ Cap1, co-capped ▪ Cap1, enzymatisk avslutning |
5' UTR/3' UTR | ▪ Natur UTR-sekvens ▪ Mutant/Konstruert UTR-sekvens |
3' PolyA hale | ▪ 100A ~120A hale (anbefalt) ▪ Segmentert polyA hale ▪ Andre tilpassede haler |
Modifiserte nukleosider | ▪ Umodifiserte baser ▪ Pseudouridin (Ψ) ▪ N1-metylpseudouridin (N1Ψ) ▪ 5-metylcytosin (m5C) ▪ 5-metyluridin (m5U) ▪ 5-metoksyuridin (5moU) ▪ 2-tiouridin (s2U) ▪ 2'-O-metyl-U ▪ Andre modifikasjoner |
Integrert tjenesteflyt
Tilby en rekke tjenester fra front-end-sekvensdesign til back-end-mRNA-preparering, kvalitetskontroll og uttrykksvalidering.
Internasjonal banebrytende sekvensdesign og -optimalisering
Profesjonell mRNA-sekvensdesign og -optimalisering muliggjør effektiv mRNA-ekspresjon.
Diversifiserte nukleotidmodifikasjoner
Øker mRNA-ekspresjon effektivt og reduserer mRNA-ugunstige immunresponser.
Moden renseplattform
Ved å kombinere en konvensjonell og egendesignet rensemetode, oppnås mRNA-prøver med høy renhet
Komplett QC-plattform
Berik QC-alternativer for å møte kravene til rutinetester, for eksempel konsentrasjon, A260/280-renhet og integritet, samt høye kvalitetskontrollkrav, for eksempel avdekningseffektivitet/polyA-distribusjon.
Kjapp levering
Tilpasset mRNA kan leveres på så raskt som 7 dager bortsett fra outsourcet sekvenssyntese.