Enzytmessig reagens

Enzytmessig reagens

Modalitet

Tag-fjerning Proteaser

For å forbedre oppløseligheten og forenkle renningsprosessen av rekombinante proteiner, legger forskere vanligvis til fusionsmerknader, hvorav His-merkning, maltoz-bindende protein (MBP) og glutation-S-transferase (GST) er vanligst brukt.

Selv om merket er et ekstra sekvens av protein, bør det fjernes for å opprettholde biologisk aktivitet i farmaseneindustrien. Fjerning av fusionsmerknader krever stedsspesifikke proteaser, som enterokinase (EK), trombin, tobakkets grav-protease (TEVp), menneskelig rhinovirus protease 3C (HRV3C), liten ubiquitin-modifiserende protein (SUMO) protease, tobakkets åre-mønster virus (TVMV) protease og karboksypeptidas A/B (CPA/CPB).

Type	Enzym	Gjenkjenningssted
Taggfjernende endoproteaser	Enterokinase (EK), enteropeptidase	DDDDK↓
	trombin	LVPR↓GS
	TEV-protease	ENLYFQ↓G
	HRV3C-protease	LEVLFQ↓GP
	SUMO protease	SUMO tertiær struktur
	TVMV protease	ETVRFQG↓S
Tag-fjerning exoproteaser	Carboxypeptidase A (CPA)	C-terminal amino syrer, unntatt Pro, Lys og Arg
Tag-fjerning exoproteaser	Carboxypeptidase B (CPB)	C-terminal Lys og Arg

Andre proteaser

Anvendelse	Enzym	Funksjon
Andre proteaser	Protease K	En serinprotease som fordøyer proteiner ved å hydrolyser pepidsammenkoblinger.
	IdeS, IgG-protease	IgG-fordelende enzymer (Ides) som klipper på et spesifikt sted i immunoglobulin G (IgG), genererende Fab- og Fc-fragmenter
	IgA1-protease	En proteolytisk enzym som klyver spesifikk sted i menneskelig immunoglobulin A1 (IgA1) hingeregionssekvens.

Nuklease

Anvendelse	Enzym	Funksjon
Nuklease	Nuklease	Klipper nukleinsyrer (DNA eller RNA) ved å hydrolyse fosfodiesterbindingene.
Nuklease	Restriksjonsenzyme	En endonuklease som klipper DNA ved eller nær spesifikke steder.

Amidase

Anvendelse	Enzym	Funksjon
Amidase	PNGase F	Klyver mellom den innerste GlcNAc og asparaginresiduen av høy mannose, hybrid og komplekse oligosakkarider.

Alle kategorier

Enzytmessig reagens

Modalitet