Enzim Utama untuk Pengeluaran RNA Panjang
mRNA, sebagai sejenis RNA pengekodan panjang, dilakukan dengan selamat dan cekap dalam julat orang yang lebih luas semasa COVID-19. RNA pengekodan panjang yang lain, seperti RNA penguat diri (saRNA) dan mRNA bulat (circular mRNA) juga menunjukkan kecekapan dalam kajian pra-klinikal dan klinikal.
Pengeluaran skala besar RNA pengekodan panjang bergantung pada transkripsi in vitro (IVT) oleh beberapa tindak balas enzim. Langkah-langkah penghasilan RNA termasuk penyediaan DNA templat, sintesis RNA IVT, peredaran, penyingkiran DNA, pengubahsuaian RNA (penutup dan tailing), dan penulenan RNA.
Terdapat beberapa enzim utama yang digunakan dalam penghasilan RNA pengekodan panjang (cth, mRNA, saRNA, dan circRNA), termasuk endonucleases sekatan, T7 RNA polymerase (T7 RNAP), perencat RNase, pyrophosphatase tak organik, DNase I, enzim capping vaccinia dan RNase R.
|
Proses
|
Enzim
|
fungsi
|
|
Penyediaan DNA templat
|
Endonuklease sekatan
|
Linearisasi DNA plasmid (pDNA) untuk mengelakkan penjanaan transkrip yang lebih panjang.
|
|
Sintesis RNA IVT
|
T7 RNA polimerase (T7 RNAP)
|
Ikat pada promoter T7 dan jana transkrip RNA tertentu; Main peranan penting semasa tindak balas IVT.
|
|
Perencat RNase, rekombinan
|
Menghalang aktiviti RNase semasa tindak balas IVT.
|
|
Pyrophosphatase, Bukan Organik (iPPase)
|
Cegah pirofosfat semasa tindak balas IVT.
|
|
penyingkiran DNA
|
DNase I
|
Keluarkan templat DNA.
|
|
pengubahsuaian RNA
|
Enzim pembatas Vaccinia
|
Tambahkan struktur Cap1 pada hujung 5′ IVT mRNA.
|
|
2'-O-Methyltransferas
|
|
pengayaan circRNA
|
RNase R
|
Mencerna RNA linear dan memperkayakan RNA bulat.
|
Yaohai Bio-Pharma Menawarkan Penyelesaian CDMO Sehenti untuk Enzim
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
TIDAK
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
