Protease Pembuangan Tag
Untuk meningkatkan keterlarutan dan memudahkan proses penulenan protein rekombinan, penyelidik biasanya menambah tag gabungan, di mana tag-Nya, protein pengikat maltosa (MBP), dan glutathione-S-transferase (GST) biasanya digunakan.
Walaupun ditandakan sebagai urutan tambahan protein, ia harus dialih keluar untuk mengekalkan aktiviti biologi dalam industri farmaseutikal. Penyingkiran tag gabungan memerlukan protease khusus tapak, seperti enterokinase (EK), trombin, protease virus goresan tembakau (TEVp), protease rhinovirus manusia 3C (HRV3C), protein pengubah suai ubiquitin kecil (SUMO) protease, virus mottling vena tembakau ( TVMV) protease, dan carboxypeptidase A/B (CPA/CPB).
Jenis
|
Enzim
|
Tapak Pengiktirafan
|
Endoprotease penyingkiran tag
|
Enterokinase (EK), Enteropeptidase
|
DDDDK↓
|
Trombin
|
LVPR↓GS
|
protease TEV
|
ENLYFQ↓G
|
HRV3C protease
|
LEVLFQ↓GP
|
SUMO protease
|
Struktur tertiari SUMO
|
protease TVMV
|
ETVRFQG↓S
|
Eksoprotease penyingkiran tag
|
Carboxypeptidase A (CPA)
|
Asid amino terminal C, kecuali Pro, Lys dan Arg
|
Carboxypeptidase B (CPB)
|
C-terminal Lys dan Arg
|
Protease lain
Kesesuaian
|
Enzim
|
fungsi
|
Protease lain
|
Protease K
|
Protease serin yang mencerna protein dengan menghidrolisis ikatan peptida.
|
IdeS, IgG protease
|
Enzim (Ides) merendahkan IgG yang membelah pada tapak khusus imunoglobulin G (IgG), menghasilkan serpihan Fab dan Fc
|
IgA1 protease
|
Enzim proteolitik yang membelah tapak tertentu dalam jujukan rantau engsel imunoglobulin A1 (IgA1) manusia.
|
Nuklease
Kesesuaian
|
Enzim
|
fungsi
|
Nuklease
|
Nuklease
|
Memecah asid nukleik (DNA atau RNA) dengan menghidrolisis ikatan fosfodiester.
|
Hadkan enzim
|
Endonuklease yang membelah DNA pada atau berhampiran tapak tertentu.
|
Amidase
Kesesuaian
|
Enzim
|
fungsi
|
Amidase
|
PNGase F
|
Membelah antara sisa GlcNAc dan asparagin yang paling dalam bagi mannose tinggi, hibrid dan oligosakarida kompleks.
|
Yaohai Bio-Pharma Menawarkan Penyelesaian CDMO Sehenti untuk Reagen Enzimatik