Minicircle DNA (mcDNA) adalah vektor DNA bukan virus yang lebih kecil, berasal dari struktur seperti DNA plasmid induk. Minicircle DNA berbeza daripada DNA plasmid konvensional kerana ia mengandungi promotor dan gen minat (GOI), tanpa asal replikasi (ORI) dan penanda pilihan (selMark). Minicircle DNA dihasilkan dalam bakteria melalui rekombinasi in vivo untuk mengeluarkan urutan tambahan (dipanggil mini-plasmid) daripada DNA plasmid. Oleh kerana keselamatannya, minicircle DNA telah menjadi popular sebagai vektor bukan virus untuk terapi gen, vaksin DNA, dll.
Rajah 1. Struktur DNA Plasmid (pDNA) dan Minicircle DNA (mcDNA)
Sistem Rekombinasi Minicircle DNA
Terdapat empat sistem rekombinasi in vivo utama bagi minicircle DNA yang telah dikaji, termasuk Phage λ integrase, Phage P1 Cre recombinase, ParA resolvase, PhiC31 integra se/I-SceI.
|
Strategi
|
Phage λ integrase
|
Phage P1 Cre recombinase
|
ParA resolvase
|
PhiC31 integra se/I-SceI
|
|
Mekanisme
|
Rekombinase tirrosin, yang berfungsi melalui protein FIS dan IHF untuk memediasi rekombinasi laman hybrid att
|
Rekombinase tirrosin spesifik-lokasi, yang menjalankan rekombinasi dua arah apabila mengikat kepada lokus loxP
|
Rekombinase serina, yang menjalankan rekombinasi yang tidak dapat dipulihkan dan satu arah di antara dua laman MRS yang identik
|
Rekombinase serina, yang memediasi rekombinasi satu arah di antara laman ikatan attP/attB, sementara endonuklease I-SceI memotong bahan sampingan produk terkait dan plasmid induk yang belum direkombinasikan
|
|
Ciri-ciri
|
Bergantung kepada ungkapan faktor hos FIS dan IHF; toksiti intrinsik; plasmid induk dan mini-plasmid sisa
|
Plasmid induk dan mini-plasmid sisa
|
Hasil tinggi; plasmid induk dan mini-plasmid sisa
|
Penguraian plasmid induk berkaitan dengan hasil yang berkurang
|
Yaohai Bio-Pharma Menawarkan Penyelesaian CDMO Satu Henti untuk DNA Minicircle
Rujukan:
[1] Almeida AM, Queiroz JA, Sousa F, Sousa Â. Minicircle DNA: Adakah Ia Masa Depan untuk Vektor Berasaskan DNA? Trends Biotechnol. 2020 Oct;38(10):1047-1051. doi: 10.1016/j.tibtech.2020.04.008.
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
