Enzim Utama untuk Pengeluaran Long-RNA
mRNA, sebagai jenis RNA kod long, berfungsi dengan selamat dan cekap dalam kelompok orang yang lebih luas semasa pandemik COVID-19. RNA kod panjang lain seperti RNA self-amplifying (saRNA) dan circular mRNA (circRNA) juga menunjukkan kecekapan dalam kajian pra-klinik dan klinik.
Pengeluaran skala besar RNA kod panjang bergantung kepada transkripsi in vitro (IVT) melalui beberapa tindak balas enzimatik. Langkah-langkah pengeluaran RNA termasuk penyiapan DNA templat, sintesis RNA IVT, sirkulasi, pengalihan DNA, pengubahsuaian RNA (penutupan dan ekor), dan pemurnian RNA.
Terdapat beberapa enzim utama yang digunakan dalam pengeluaran RNA kod panjang (contohnya, mRNA, saRNA, dan circRNA), termasuk restriksi endonukleaza, polimerasa RNA T7 (T7 RNAP), penghalang RNase, pirofosfatase anorganik, DNase I, enzim penutup vaccinia dan RNase R.
|
Proses
|
Enzim
|
Fungsi
|
|
Penyediaan DNA Templat
|
Endonukleasa penghantaran
|
Penglinearan DNA plasmid (pDNA) untuk mengelakkan penjanaan transkrip yang lebih panjang.
|
|
Sintesis RNA IVT
|
Polimerase RNA T7 (T7 RNAP)
|
Menyambung kepada promotor T7 dan menghasilkan skrip RNA spesifik; Memainkan peranan utama semasa tindak balas IVT.
|
|
Penyahkis RNase, rekombinan
|
Menghalang aktiviti RNase semasa tindak balas IVT.
|
|
Pirofosfatase, anorganik (iPPase)
|
Mencegah pirofosfat semasa tindak balas IVT.
|
|
Pembuangan DNA
|
DNase I
|
Mengalih keluar templat DNA.
|
|
Pemodifikasian RNA
|
Enzim penutup Vaccinia
|
Tambahkan struktur Cap1 ke hujung 5′ mRNA IVT.
|
|
2’-O-Metilpemindah
|
| penyempurnaan circRNA |
Rnase R |
Cerna RNA linear dan kaya RNA bulat. |
Yaohai Bio-Pharma Menawarkan Penyelesaian CDMO Satu Henti untuk Enzim
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
