Tehnoloogiad, mis on mRNA sünteesis kasutusel

Modaalsus

Tehnoloogiad, mis on mRNA sünteesis kasutusel

MRNA in vitro süntees

MRNA peamised komponendid on 5’-kapp, 5’-UTR, avatud lugemisraam (ORF), 3’-UTR ja 5’ polü A hääl, mis on olulised mRNA funktsiooni säilitamiseks. Uurijad on kasutanud mitmeid meetodeid mRNA järjestuste ja struktuuride tuvastamiseks ja optimeerimiseks.

MRNA süntees toimub in vitro transkripti (IVT) alusel, kasutades lineaarseid DNA mallimuunde, RNA polümeraase (T3, T7 või SP6), muutmata või muudetud nukleotiidide, enzyymi ja sobivate reagentidega.

5’ Kapp Muutmine

Keelekeste mRNA järjendid eukariotsetes näitavad 7-metüülguanosiin (m7G) kappi 5' lõpul, mis parandab mRNA stabiilsust ja tõlgetõhusust. In vitro mRNA võtmine toimub kahe peamise meetodi abil. Esiteks saab mRNA in vitro transkriptiga kokku kappida, lisades m7GpppG struktuuri (nt CleanCap) cap analoogi IVT süsteemi. See kooskirjutuslik kappimismeetod pakub loomulikku 5' kapsli struktuuri ja suurendab kappimisefektiivsust ligi 90-99%. Teiseks võib mRNA kaarti teha kaartimise enzüümreaktsioonidega, mis järgnevad in vitro transkriptsioonireaktsioonile.

PolyA muundamine

Poly(A) saba pikendab ka mRNA pooleliikumisaega organismis ja parandab mRNA tõlkimise efektiivsust. Amplifitseeritud poly(A) saja pikkus peaks olema 100-300 nukleootidi vahel. Lisaks suurendab muudetud adenoosi poly A saja stabiilsust raku RNase degradatsiooni vastu. Poly A saja saab lisada in vitro transkriptsiooniga, kasutades DNA malli, mis kodeerib poly A saja, mis viib spetsiifilise poly A saja pikkusega tulemusele. Enzymaatset polyadenüülatsiooni saab teostada ka rekombinantse poly A polümeraasi abil pärast mRNA transkriptsiooni.

Nukleootidite muundamine

Muundatud nukleosiidid võivad inhibeerida möödustusreceptorite (PRR) tuvastamist ja/või aktiveerimist ning suurendada mRNA vaktsiinide effektiivsust kahe täiesti erineva viisi. Teatud keemiliselt muundatud nukleosiidide, sealhulgas pseudouraciili (ψ), 1-metüülpseudouraciili (m1ψ), tiouriidi (s4U) ja 5-metüültsütoosiini (m5C), lisamine võib takistada TLR7/8 ja teiste sündika immuunireceptorite aktiveerimist, mis vähendab oluliselt mRNA immunogeenust.

mRNA toimetamissüsteem

Et säilitada mRNA funktsioon, peab see jõudma majandusseokruumi seesse ja väljendama spetsiifilisi antigeene. Üks suurimatest väljakutsetest, millega silmitses seisavad mRNA vaktsiinid ja raviained, on mRNA toimetamine sihtmolekuleesse piisavalt kõrge tõlkimise taseme tagamiseks, mis nõuab erakorraliselt spetsiifilisi ja efektiivseid mRNA toimetamissüsteeme. On arendatud mitmeid mRNA toimetamisvektoreid, sealhulgas dendriitsete rakude (DCs), protamiini, kationiidpolümeeride ja kationiidliposoomide kasutamist.

Kationsete lipiidi kompleksid mRNA-ga ja muude ettevalmistustega võivad koos moodustada 80-200 nm suurused nanopartiklid, mida nimetatakse lipiidseteks nanopartikliteks (LNPs). Üheks kõige edasimarssiliseks mRNA toimetamissüsteemiks on LNP, mis sisaldab ioniseeritavaid kationseid lipiide, looduslikke fosfolidiide, kolesteroli ja polueetileneglykooli (PEG). Mitu RNA vaktsiinist ja terapiatest (siRNA ja mRNA), mida on heaks kiitnud Ameerika Tervishoiu- ja Tarbijakaitseamet (FDA), põhineb LNP toimetamissüsteemidel.

Yaohai Bio-Pharma Pakub Ühepealset Töötlemise lahendust RNA jaoks

Kataloogi RNA tooted

Kataloogi mRNA tooted
Kataloogi saRNA tooted
Kataloogi circRNA tooted

Kohandatud RNA süntees

Kohandatud mRNA süntees
Kohandatud saRNA süntees
Kohandatud circRNA süntees

mRNA CDMO teenused

Protsessi arendamine
GMP tootmine
Steriilne täitmise ja lõpetamise protsess
Analüüs ja testimine

Kohandatud Toode

Hinne	Toodetavad tulemused	Spetsifikatsioon	Rakendused
mitte-GMP	Ravimaterjal, mRNA	0,1~10 mg (mRNA)	Eelkliiniline uurimine, nagu rakute kandmine, Analüütilise meetodi arendamine, Eel-stabiilsus-uuringud, Vormearenduse arendamine
	Ravimistoode, LNP-mRNA
GMP, Steriilsus	Ravimaterjal, mRNA	10 mg~70 g	Uurimisravimi taotlus (IND), Kliinilise uuringu luba (CTA), Kliinilise uuringu tagatis, Bioloogilise litsentsitaotlus (BLA), Tööstlik tagatis
	Ravimistoode, LNP-mRNA	5000 puhast või eelmääratletud sülmik/kaartid

Kõik kategooriad

Tehnoloogiad, mis on mRNA sünteesis kasutusel

Modaalsus