Сінтэз mRNA віта
Галоўныя кампаненты mRNA - гэта 5'-капа, 5'-UTR, адкрыты чытальны фрэйм (ORF), 3'-UTR і 5'-полі A хвост, якія неабходныя для падтрымкі функцыяльнасці mRNA. Даследчыкі выкарыстоўвалі розныя метады для ідэнтыфікацыі і аптымізацыі секвенцыі і структуры mRNA.
Сінтэз mRNA выконваецца на аснове транскрыпцыі віта (IVT) з выкарыстаннем лінейных DNA-шаблонаў, RNA-палімераз (T3, T7 або SP6), незменных ці зменных нуклеатыдаў, энзымоў і дапушчальных рэагентаў.
модыфікацыя 5'-капы
Паслядоўнасці дадзенага mRNA ад еукарыятнай клеткі паказваюць капу 7-метылгуанозіну (m7G) ў 5' канцы, якая павялічвае стаякасць mRNA і эфектыўнасць транслатацыі. Існуе два агульных метады для захоплення mRNA віта. Пры першым, mRNA можа быць каплена разам з транскрыпцыйным вітрам даўжэннем дадзення кап-аналага структуры m7GpppG (напрыклад, CleanCap) ў сістэму IVT. Гэты метад капіравання падчас транскрыпцыі прынімае натуральную 5' капсулую структуру і павялічвае эфектыўнасць капіравання да май і 90-99%. У другім выпадку, карта mRNA таксама можа быць створана праз ферментныя рэакцыі пасля транскрыпцыйнай рэакцыі віта.
Модыфікацыя PolyA
Палі(А) хвост таксама падлінжае палаву жыцця mRNA ў живых клеткі і падвышвае эфектыўнасць транслідацыі mRNA. Дына poly(A) хвоста мае быць 100-300 нуклеатыдных звестак. Кропка, модифікаваны адэназін збяльшвае стабільнасць poly A хвоста супраць дэградацыі клетковым RNase. Poly A хвост можа быць ўставлены праз транскрыпцыю in vitro з выкарыстаннем DNA шаблона, які кодуе poly A, што прыводзіць да спецыфічнай даўжыні poly A звесткі. Таксама можна выкарыстоўваць рекамбінантную poly A полімеразу для энзыматычнай поліадэніляцыі пасля транскрыпцыі mRNA.
Модыфікацыя нуклеатыдзаў
Мадифікаваныя нуклеазіды магут тормазіць рэканазнайшчыню шаблонаў (PRR) і/або актывацыю і павялічваць эфектыўнасць вакцын на базе mRNA ў дзвюх цалкам розных спосабах. Даданне пэўных хіміячна мадифікаваных нуклеазідаў, уключна псевдуюрыдыну (ψ), 1-метылпсевдуюрыдыну (m1ψ), тиояурыдыну (s4U) і 5-метылсітызін (m5C), можа запамятаваць актывацыю TLR7/8 і іншых імунных рэцэптараў, што значна зменшыць імунагеннасць mRNA.
сістэма дастаўкі mRNA
Для захоўвання функцыі mRNA яна павінна ўвайсці ў цытаплазму хоста і экспрэсаваць спецыфічныя антыгены. Адна з найскладнейшых працяг акурат mRNA-вакцын і лікаў заключаецца ў дастаўцы mRNA ў цэлевыя клеткі з дастаткова высокімі ўзроўнямі трансляцыі, для чаго патрабуецца выsoспэцыфічныя і эфектыўныя сістэмы дастаўкі mRNA. Было разработана і выкарыстана некалькі вектараў дастаўкі mRNA, уключаючы дендрытычныя клеткі (DCs), протамін, катыонныя полімеры і катыонныя ліпазы.
Камплексы катыонных ліпідваў з mRNA і іншымі падгатаваннямі могуць разам утвараць наначастцы розмахам 80-200 нм, якія называюцца ліпіднымі наначастцамі (LNPs). Як адна з самых сучасных сістэм даступу mRNA, LNP ўключае іональныя катыонныя ліпіды, натуральныя фосфаліды, халестерал і поліэталенгліколь (PEG). Нескачыста вакцын на базе RNA і тэрапій (siRNA і mRNA), вымяшчаных У.S. Адміністрацыя па кантролю прыкладных вытвораў, заснагоджана на сістэмах достаўкі LNPs.
Yaohai Bio-Pharma Прапануе Інтэгральнай Рашэнне для RNA
|
Каталог RNA-вырабоў
- Каталог продукцый mRNA
- Каталог продукцый saRNA
- Каталог продукцый circRNA
|
Замовіць синтэз RNA
- Замовіць синтэз mRNA
- Даручальная сінтэзіса saRNA
- Даручальная сінтэзіса circRNA
|
паслугі CDMO mRNA
- Развіццё працэсу
- Вытворэнне па GMP
- Асептычнае запаўненне і завяршэнне
- Аналіз і тэсты
|
Застаўныя Вывады
|
Клас
|
Вынікі
|
Спецыфікацыя
|
Застосаванні
|
|
не-GMP
|
Субстанцыя лекарства, mRNA
|
0.1~10 мг (mRNA)
|
Даследы прэклінічнай фазы, такія як трансфекцыя клетак, розробка аналітычных метадаў, прадстаялыя даследаванні, разьвіцца формулявання
|
|
Лекарственная прыгожа, LNP-mRNA
|
|
GMP, Стерыльнасць
|
Субстанцыя лекарства, mRNA
|
10 мг~70 г
|
Заявка на даследаванне новага леkarственнага засобу (IND), Дазволенне на клянічны даслед (CTA), Клянічная даследавальная вытвор, Заяўка на ліцензію біялогічнага засобу (BLA), Камерцыяльная вытвор
|
|
Лекарственная прыгожа, LNP-mRNA
|
5000 флаконав ці шприцаў / картрыджоў
|
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
