ดีอะมิเดชันของกลูตามีนและแอสพาราจีนด้านข้างเป็นการปรับเปลี่ยนทั่วไปในแง่ของผลกระทบต่อคุณสมบัติของชีวเภสัชภัณฑ์โปรตีน ดีอะมิเดชันสามารถเกิดขึ้นได้ในกลูตามีนที่ตกค้าง แต่โดยปกติแล้วจะมีอัตราที่ต่ำกว่ามาก อัตราดีอะมิเดชันขึ้นอยู่กับอุณหภูมิ, pH, โครงสร้างโปรตีนเฉพาะที่ และเรซิดิวอะมิโนเอซิลที่อยู่ขนาบข้าง
Yaohai BioPharma นำเสนอบริการทดสอบดีอะมิเดชันของกรดอะมิโน ซึ่งช่วยให้คุณสามารถตรวจจับดีอะมิโนของกรดอะมิโนด้วย Liquid Chromatography-Mass Spectrometry (LC-MS)
เรามีส่วนร่วมในการระบุลักษณะโครงสร้างโปรตีนของโมเลกุลขนาดใหญ่ต่างๆ รวมถึงวัคซีนหน่วยย่อยรีคอมบิแนนท์, นาโนบอดี/VHHs/ แอนติบอดีโดเมนเดียว (sdAbs), ชิ้นส่วนแอนติบอดี, ฮอร์โมน/เปปไทด์, ไซโตไคน์, ปัจจัยการเจริญเติบโต (CF), เอนไซม์, คอลลาเจน, ฯลฯ
ข้อกำหนดด้านกฎระเบียบสำหรับการกำจัดกรดอะมิโน
ตามแนวทาง ICH Q6B รูปแบบดีอะมิเดตอาจถูกตรวจพบและแสดงคุณลักษณะโดยวิธีโครมาโทกราฟี อิเล็กโตรโฟเรติก และ/หรือวิธีการวิเคราะห์ที่เกี่ยวข้องอื่นๆ
วิธีการวิเคราะห์
การวิเคราะห์ |
วิธีการ |
การทำลายล้าง |
โครมาโตกราฟีของเหลว-แมสสเปกโตรเมทรี (LC-MS) |
ขั้นตอนการ
เช่น แอสพาร์ติกดีอะมิเดชัน
1. การย่อยด้วยเอนไซม์
2. LC-MS ภายใต้เงื่อนไข High-Performance Liquid Chromatography (HPLC)
3 การวิเคราะห์ข้อมูล
ดีอะมิเดชันของแอสพาราจีนเกิดขึ้นผ่านซัคซินิไมด์ตัวกลาง (Suc) ซึ่งไวต่อการเกิดราซิมิเซชันและการไฮโดรไลซิส ทำให้ได้ไอโซเมอร์ของ Asp สี่ตัว ซึ่งรวมถึง L-Asp, L-IsoAsp, D-Asp และ D-IsoAsp
ตามทฤษฎี Gln ดีอะมิเดชันสามารถสร้างไอโซเมอร์ของ Glu ที่สอดคล้องกันสี่ตัวผ่านกระบวนการที่คล้ายกับ Asn ดีอะมิเดชัน
แมสสเปกโตรเมตรีที่มีความละเอียดสูงสามารถระบุความแตกต่างของมวล 1-Da ระหว่างเปปไทด์ที่มี Asn/Gln และ Asp/Glu ที่เทียบเท่ากับดีอะมิเดตที่สอดคล้องกันได้อย่างง่ายดาย