การวิเคราะห์ N-glycan เป็นสิ่งสำคัญสำหรับการผลิตยาชีวภาพ ยาไฮ ไบโอ-ฟาร์มา ให้บริการวิเคราะห์ N-glycan โดยใช้โครมาโตกราฟีของเหลว-สเปกโตรโฟโตเมตร์มวล (LC-MS) สำหรับไกลโคแคนที่ถูกปล่อยและทำเครื่องหมาย ขั้นตอนทั่วไปในการเตรียมตัวอย่าง N-glycan รวมถึงการย่อยโปรตีนไกลโคโปรตีน (GP), การแยกกลุ่มเชิงน้ำตาล, การฟอกเก็บ, การทำเครื่องหมาย/การเปลี่ยนรูป และการสกัดเฟสแข็ง (SPE)
เราได้มีส่วนร่วมในการวิเคราะห์ลักษณะโครงสร้างโปรตีนของโมเลกุลขนาดใหญ่หลายชนิด เช่น วัคซีนย่อยที่ถูกผลิตใหม่ นาโนบอดี้/VHHs/แอนติบอดีโดเมนเดียว (sdAbs) ชิ้นส่วนแอนติบอดี ฮอร์โมน/เปปไทด์ ไซโตไคน์ แฟคเตอร์การเจริญเติบโต (GF) เอนไซม์ คอลลาเจน เป็นต้น
ข้อกำหนดด้านกฎระเบียบสำหรับการวิเคราะห์ N-Glycan
ตามแนวทาง ICH Q6B “สำหรับไกลโคโปรตีน ปริมาณคาร์โบไฮเดรต (น้ำตาลที่เป็นกลาง น้ำตาลอามิโน และกรดไซอาลิก) จะถูกกำหนด นอกจากนี้ โครงสร้างของโซ่คาร์โบไฮเดรต รูปแบบโอลิโกแซคคาไรด์ (โปรไฟล์แอนเทนนา) และตำแหน่งการไกลโคซิเลชันของสายพอลิเพปไทด์จะถูกวิเคราะห์ในขอบเขตที่เป็นไปได้
วิธีการทางเคมีวิเคราะห์
| การวิเคราะห์ |
วิธีการ |
| การวิเคราะห์โปรไฟล์ N-glycan |
การวิเคราะห์ Liquid Chromatography-Mass Spectrometry (LC-MS) ของไกลคานที่ปล่อยและทำเครื่องหมายแล้ว |
ขั้นตอน
1. การปล่อยไกลคานด้วยเอนไซม์ Peptide N-Glycosidase F (PNGase F)
2. การทำให้เกิดปฏิกิริยาของไกลคานที่ปล่อยออกมาโดยใช้ 2-aminobenzamide (2-AB)
3. การฟอกของ N-ไกลคานที่เก็บรวบรวมบนหลัก TSK Amide - 80 หากมีสารสบู่ สารเกลือที่ไม่ระเหย หรือสารที่มีกลุ่มอะมีโนอิสระอยู่ในปริมาณมาก
4. การทำเครื่องหมายด้วย 2-aminobenzamide (2-AB) ที่เรืองแสง
5. การวิเคราะห์ LC-MS ของ N-ไกลคานที่ทำเครื่องหมายแล้ว
6. การวิเคราะห์ข้อมูล
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
