การดีอามิเดชันของโซ่ข้างของกลูตามีนและแอสพาแรจินเป็นการเปลี่ยนแปลงที่พบบ่อยในแง่ของผลกระทบต่อคุณสมบัติของโปรตีนเภสัชภัณฑ์ชีวภาพ การดีอามิเดชันสามารถเกิดขึ้นได้ในตำแหน่งเรซิทูของกลูตามีน แต่มักจะเกิดในอัตราที่ต่ำกว่ามาก อัตราการดีอามิเดชันถูกควบคุมโดยอุณหภูมิ pH โครงสร้างโปรตีนในท้องถิ่น และอนุภาคกรดอะมิโนที่อยู่ใกล้เคียง
Yaohai BioPharma ให้บริการทดสอบการดีอามิเดชันของกรดอะมิโน ซึ่งช่วยให้คุณตรวจจับการดีอามิเดชันของกรดอะมิโนด้วยโครมาโทกราฟีแบบของเหลว-สเปกโตรเมตรีมวล (LC-MS)
เราได้มีส่วนร่วมในการวิเคราะห์โครงสร้างโปรตีนของโมเลกุลขนาดใหญ่หลายชนิด เช่น วัคซีนย่อยที่ผลิตใหม่ นาโนบอดี้/VHHs/แอนติบอดีโดเมนเดียว (sdAbs) ชิ้นส่วนแอนติบอดี ฮอร์โมน/เปปไทด์ ไซโตไคน์ ปัจจัยการเจริญเติบโต (CF) เอนไซม์ คอลลาเจน เป็นต้น
ข้อกำหนดทางกฎระเบียบสำหรับการดีอามิเดชันของกรดอะมิโน
ตามแนวทางของ ICH Q6B รูปแบบที่เกิดการ deamidated อาจตรวจพบและลักษณะโดยวิธีการทางโครมาโทกราฟี เอเล็กโทรโฟรีซิส และ/หรือวิธีการวิเคราะห์อื่น ๆ ที่เกี่ยวข้อง
วิธีการทางการวิเคราะห์
| การวิเคราะห์ |
วิธีการ |
| การเดออะไมดาชัน |
โครมาโทกราฟีด้วยของเหลวพร้อมการวิเคราะห์มวล (LC-MS) |
ขั้นตอน
ตัวอย่างเช่น การ deamidation ของแอสพาติก
1. การย่อยเอนไซม์
2. LC-MS ในเงื่อนไขของ High-Performance Liquid Chromatography (HPLC)
3. การวิเคราะห์ข้อมูล
การ deamidation ของแอสพาราจินเกิดขึ้นผ่านสารกลาง succinimide (Suc) ซึ่งมีความไวต่อการ racemization และการไฮโดรไลซิส ส่งผลให้เกิดไอโซเมอร์ของแอสพาติก 4 ชนิด รวมถึง L-Asp, L-IsoAsp, D-Asp และ D-IsoAsp
ในทฤษฎี การ deamidation ของกลูตามิลสามารถสร้างไอโซเมอร์ของกลูตาเมต 4 ชนิดที่สอดคล้องกันผ่านกระบวนการที่คล้ายคลึงกับการ deamidation ของแอสพาราจิน
สเปกโตรมิเตอร์วิเคราะห์มวลระดับสูงสามารถระบุความแตกต่างของมวล 1-Da ระหว่างเพปไทด์ที่มี Asn/Gln และเพปไทด์ที่เกิดการ deamidated ซึ่งเปลี่ยนเป็น Asp/Glu ได้อย่างง่ายดาย
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
