Keskeiset entsyymit pitkän RNA:n tuotantoon
mRNA, eräänlaisena pitkään koodaavan RNA:n tyyppi, toimi turvallisesti ja tehokkaasti laajemmassa ihmisjoukossa COVID-19:n aikana. Muut pitkään koodaavat RNA:t, kuten itsevahvistava RNA (saRNA) ja sirkulaarinen mRNA (circRNA), osoittivat myös tehokkuutta prekliinisissä ja kliinisissä tutkimuksissa.
Pitkän koodaavan RNA:n laajamittainen tuotanto perustuu in vitro -transkriptioon (IVT) useiden entsymaattisten reaktioiden avulla. RNA-tuotannon vaiheita ovat templaatti-DNA:n valmistus, IVT-RNA-synteesi, verenkierto, DNA:n poisto, RNA:n modifiointi (korkeus ja pyrstö) ja RNA:n puhdistus.
Pitkään koodaavan RNA:n (esim. mRNA, saRNA ja sircRNA) tuotannossa käytetään useita avainentsyymejä, mukaan lukien restriktioendonukleaasit, T7 RNA-polymeraasi (T7 RNAP), RNaasi-inhibiittori, epäorgaaninen pyrofosfataasi, DNaasi I, vaccinia capping -entsyymi ja RNaasi R.
|
Käsitellä asiaa
|
Entsyymi
|
Toiminto
|
|
Templaatti-DNA:n valmistus
|
Restriktioendonukleaasit
|
Plasmidi-DNA:n (pDNA) linearisointi pidemmän transkriptin muodostumisen välttämiseksi.
|
|
IVT RNA-synteesi
|
T7 RNA-polymeraasi (T7 RNAP)
|
Sitoudu T7-promoottoriin ja muodosta spesifinen RNA-transkripti; Avainrooli IVT-reaktion aikana.
|
|
RNaasi-inhibiittori, rekombinantti
|
Inhiboi RNaasi-aktiivisuutta IVT-reaktion aikana.
|
|
Pyrofosfataasi, epäorgaaninen (iPPaasi)
|
Estä pyrofosfaatti IVT-reaktion aikana.
|
|
DNA:n poisto
|
DNAaasi I
|
Poista DNA-templaatti.
|
|
RNA:n modifikaatio
|
Vaccinia capping entsyymi
|
Lisää Cap1-rakenteita IVT-mRNA:n 5'-päihin.
|
|
2'-O-metyylitransferaat
|
| sircRNA:n rikastaminen |
RNaasi R |
Pilko lineaarinen RNA ja rikasta sirkulaarista RNA:ta. |
Yaohai Bio-Pharma tarjoaa yhden luukun CDMO-ratkaisun entsyymeille
FI
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FR
DE
EL
IT
JA
KO
EI
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
