Avainenzymit pitkän RNA:n tuotantoon
mRNA, joka on yksi pitkien koodaavien RNA-molekyylien tyyppi, toimi turvallisesti ja tehokkaasti laajemmalla ihmisryhmällä COVID-19 pandemian aikana. Muut pitkät koodaavat RNA:t, kuten itselisääntyvä RNA (saRNA) ja pyöreä mRNA (circRNA), osoittivat myös tehokkuutta esiklinikoiden ja klinikoiden tutkimuksissa.
Pitkän koodaavan RNA:n suurpiirteinen tuotanto perustuu useiden enzymimaisiin reaktioihin in vitro -transkriptiossa (IVT). RNA:n valmistusprosessit sisältävät malli-DNA:n valmistamisen, IVT RNA:n synteesin, kierron, DNA:n poistamisen, RNA:n muunnoksen (kappaleiden ja hännän lisäämisen) sekä RNA:n puhdistuksen.
Useita avainenzymeja käytetään pitkän koodaavan RNA:n (esim. mRNA, saRNA ja circRNA) tuotannossa, mukaan lukien rajoitusendonukleaseja, T7 RNA-polymeraasi (T7 RNAP), RNA-haittaimeen, organofosfaattiaseen, DNase I, vaccinia-kappaleenzyymiin ja RNase R.
|
Prosessi
|
Enzymi
|
Toiminto
|
|
Malli-DNA:n valmistus
|
Rajoittumisendonukleaset
|
Plasmidi-DNA:n (pDNA) linearisointi välttääksesi pidemmän transkriptin syntymisen.
|
|
IVT RNA-synteesi
|
T7 RNA-polymeraasi (T7 RNAP)
|
Liittyvät T7-promotoriin ja tuottavat spesifisen RNA-transkriptin; Pelasointo keskeistä roolia IVT-vaiheessa.
|
|
RNase-inhibitori, rekombinantti
|
Estä RNase-toiminta IVT-reaktiossa.
|
|
Pyyrofosfaatti, inorgaaninen (iPPase)
|
Estävät pyyropyyrofosfaatin muodostumisen IVT-reaktiossa.
|
|
DNA-poisto
|
DNase I
|
Poista DNA-mallipohja.
|
|
RNA-muokkaus
|
Vaktsiinia kappale-enzyme
|
Lisää Cap1-rakenteet IVT-mRNA:n 5′ päänteisiin.
|
|
2’-O-Methylsiirtoensiymen
|
| circRNA-yksinkertaistaminen |
RNase R |
Hajota lineaarinen RNA ja riittäöön ympyrämuotoinen RNA. |
Yaohai Bio-Pharma tarjoaa yhdenmukaisen CDMO-ratkaisun ensiymille
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
