Proteiinimerkit yhdistelmä-DNA-tekniikoissa käytettyinä fuusiopartnereina mahdollistavat tehokkaan yksivaiheisen affiniteettipuhdistuksen erilaisille proteiineille/peptideille, joilla on erilaiset ominaisuudet. Tästä tärkeästä edusta huolimatta tunnisteet eksogeenisinä aminohappoina voivat muuttaa proteiinin rakennetta ja biologisia toimintoja. Siksi leimaamattomat (merkitsettömät) proteiinit tai peptidit ovat edullisempia turvallisuuden ja tehokkuuden varmistamiseksi, erityisesti biofarmaseuttisella alalla. Rekombinanttiproteiinilla, jossa on fuusiomerkki, on rajalliset mahdollisuudet saada lupa lääke-/lääkehallintovirastoilta.
Mikrobibiologian T&K-alustaan perustuva Yaohai Bio-Pharma tarjoaa räätälöityjä leimaamattomia (tunnistevapaa) proteiinien valmistuspalveluita, jotka on suunniteltu täyttämään ainutlaatuiset tavoitteet tutkimuksen, kehityksen ja valmistuksen kliiniseen käyttöön.
Avainsanat: leimaton proteiinin tuotanto, leimaamattoman proteiinin puhdistus, vapaa merkkipohjainen proteiinin valmistus, tunnisteton proteiinin ilmentäminen ja puhdistus, erittäin leimaton kohdeproteiini
Sovellus: ihmislääketieteellinen tutkimus, eläinlääkekehitys, yhdistelmärokotteiden kehittäminen, rekombinanttien suurimolekyylisten biologisten aineiden tuotanto
Mikrobitutkimus- ja kehitysalustamme
Meillä on kokemusta mikrobikantojen suunnittelusta, fermentoinnista ja tuotteiden puhdistuksesta.
Bakteerit: Escherichia coli (E. coli)
Hiiva: Pichia pastoris (P. pastoris), Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae), Hansenula polymorpha (H. polymorpha)
Mukautetut asetukset
Liikennemuotojen |
Rekombinantti proteiini |
Lähtöaineet |
Geenisekvenssit, rekombinanttiplasmidi tai muokatut kannat |
Tuotokset |
Puhdista: >80 %, >85 %, >90 % Määrä: 0.2-10 g (määritetään projektin mukaan) |
Ilmaisujärjestelmä ja muodostus |
E. coli periplasminen eritys, liukoisen ja inkluusiokappaleen ilmentyminen;
Hiivan solunsisäinen tai eritysekspressio
|
Analyysimenetelmät |
Ultravioletti (UV), bikinkoniinihappomääritys (BCA), Bradford tai Lowry määrän suhteen Natriumdodekyylisulfaattipolyakryyliamidigeelielektroforeesi (SDS-PAGE) puhdistustestaukseen Valinnainen: Western blot (WB), entsyymikytkentäinen immunosorbenttimääritys (ELISA), korkean suorituskyvyn nestekromatografia (HPLC) |
Epäpuhtaudet |
Endotoksiini (valinnainen) |