mRNA on käytetty laajasti geenien tai proteiinien toimintojen tutkimisessa. Samalla se on yleistä ehkäisy- ja hoito-biologisten lääkkeiden kehittämisessä. RNA-molekyylien yleinen synteesistrategia, in vitro -transkriptio (IVT), mahdollistaa meille mukautettujen transkriptien saamisen tehokkaasti.
Yaohai Bio-Pharma on perustanut joukon mRNA-synteesitekniikoita tarjotaakseen korkealaatuisia RNA-molekyyliä, kuten sekvenssien suunnittelua ja optimointia, IVT:ää, puhdistusta, lyofilisointia ja lipoottopartikkelien (LNP) inkapselointia. Kaikki tuotteet julketaan tiukkojen laadunvalvonnan (QC) standardeja noudattaen.
Kun COVID-19-pandemia alkoi vuonna 2020, mRNA-teknologia kehittyi suurin piirtein, ja sen liittyvät tutkimukset ja sovellukset ovat saaneet ennennäkemättömän kehityksen, mukaan lukien infektioiden ehkäisemiseksi tarkoitetut profeettiset rokotteet, hoitaviralliset syöpärokotteet ja -lääkkeet, syöpähoidot, proteiininvaihtohoidot, uudistuslääketiede sekä solu- ja geeniterapia (CGT).
mRNA-rokote | mRNA-lääkeaineet |
|
Prosessi | Valinnaiset palvelut | Palvelun yksityiskohdat | Toimitusaika (työpäivä) | Toimitettava |
mRNA-sekvenssin suunnittelu ja optimointi | Koodaavien sekvenssien suunnittelu ja optimointi | CDS-sekvenssin suunnittelu ja koodonin optimointi | 1-3 | Sekvenss tiedosto |
Ei-koodaavien jonojen suunnittelu ja optimointi | UTR- ja polyA-jonojen suunnittelu ja optimointi | |||
Transkriptio-malliplasmidin valmistus | Rekombinanttisen plasmidin valmistus | Geeninsynteesi | 7-10 | |
Plasmidin kertaus ja extraktio | 4 | |||
Plasmidin linearisointi ja puhdistus | ||||
mRNA:n in vitro -transkriptio | Ko-transkriptionaalinen koppirointi (yhden vaiheen menetelmä) | In vitro -transkriptio (IVT) \/ Kappeaanalogi | 1-2 | Ei saatavilla |
Nukleotiidimuunnokset (UTP/CTP-muunnokset) | ||||
DNA-mallin poisto (DNase I) | ||||
Enzymaalinen kappaleminen (kaksivaiheinen prosessi) | IVT | 2-3 | ||
Nukleotiidimuunnokset (UTP/CTP-muunnokset) | ||||
DNA-mallin poisto (DNase I) | ||||
mRNA:n puhdistus (litiumkloridi/magneettiset perhonen) | ||||
Enzymaalinen kappaleminen | ||||
mRNA-puhdistus | Perinteinen puhdistusskeema | Litiumkloriidiputoituminen | 1 | mRNA-lääkeaine |
Magneettisten perhonen käyttöön perustuva puhdistus | ||||
Kromatografia-sarakepuhdistusskeema | Usean kromatografiamenetelmän yhdistelmä | 1-2 | ||
Puskentajan vaihto | Ultrasuodatus | 1 | ||
mRNA lyofilisointi | Lyofylointi | Esikostominen | 2-3 | mRNA lyofyloiutu pöly |
Ensimmäinen kuivatus (sublimaatio) | ||||
Toinen kuivatus (desorptio) | ||||
mRNA inkapselointi | LNP-inkapselointi | LNP-inkapselointi | 2-3 | mRNA-LNP lääkeaine |
Konsentrointi ja puskentajan vaihto | ||||
mRNA:n laadun analyysi | mRNA-lääkeaine / lyofiloitu pulveri | Konsentraatio, puistusaste | 1 | Testiraportti |
Täydellisyys, kappaus tehokkuus, polyA häntäjakauma | 2-5 | |||
mRNA-LNP lääkeaine | Kapselointitehokkuus | 1 | ||
Hiukkaspaino ja jakauma | ||||
Pinta varsinainen | ||||
mRNA:n ilmaisu vahvistaminen | 293T solu arviointi | Solujen kasvatus | 4 | |
Solujen tilapäinen transfektio | ||||
Fluoresenssisignaalin havainto | 1-3 | |||
Western blot (WB) / Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) |
5' Koro |
▪ Kapaton ▪ Cap0, yhteiskapotettu ▪ Cap1, yhteiskapotettu ▪ Cap1, enzyymillinen kapatoiminen |
5’ UTR\/3’ UTR |
▪ Luonto UTR-jono ▪ Mutantti/kehittetty UTR-jono |
3' PolyA-häntä |
▪ 100A ~120A häntä (suositeltu) ▪ Jakoittu polyA-häntä ▪ Muut mukautetut häntät |
Muunnellut nyklotiidit |
▪ Epämuokatuja kantoja ▪ Pseudourosiidi (Ψ) ▪ N1-Methylpseudouridine (N1Ψ) ▪ 5-metylisytoosi (m5C) ▪ 5-metyluridiini (m5U) ▪ 5-methoxyuridiini (5moU) ▪ 2-tiouridiini (s2U) ▪ 2′-O-metyyli-U ▪ Muut muunnokset |
Toteutettu palvelutoiminta
Tarjoamme sarjan palveluita alusta sekvenssityksen suunnitteluun asti loppuun saakka, mRNAn valmistukseen, laadunvalvontaan ja ilmaisuvahvistukseen.
Kansainvälinen edellinen sekvenssien suunnittelu ja optimointi
Ammattimainen mRNA-sekvenssien suunnittelu ja optimointi helpottavat tehokasta mRNA-ilmaisua.
Monipuoliset nukleotiidimuunnokset
Tehokkaasti lisätään mRNA-ilmaisua ja vähennetään mRNA:n haitallisia keuhkoihmisvastauksia.
Kehittynyt puhdistuslaitteisto
Perinteisen ja itse suunnitellun puhdistusmenetelmän yhdistämisen avulla saadaan mRNA-näytteitä korkealla puhdasuudella.
Kokonaislaatuvarmistusalusta
Rikastetaan laadunvalvontaa erilaisilla vaihtoehdoilla täyttääkseen tavallisten testien, kuten konentsa, A260/280-puhdasuuden ja kokonaisuuden, sekä korkean laadun valvontakriteerien, kuten peittymiseen/polyA-jakaumaan liittyvät vaatimukset.
Nopea toimitus
Mukautettuja mRNA-molekyylejä voidaan toimittaa jo 7 päivässä, paitsi ulkopuolisesti tilattujen sekvenssien synteesin osalta.