Kaikki kategoriat
mRNA ko-transkriptio kattaminen

mRNA Ko-transkriptionaali kiinnitys

Vertailtuna kahden vaiheen enzyymiselle kiinnitysmenetelmälle, yhden vaiheen ko-transkriptionaalinen kiinnityskeino voi merkittävästi vähentää prosessivirtaa. Menetelmä on tulosorientoitu ja se sisältää kapasyylikontekstin lisäämisen in vitro -transkriptioon (IVT). Kapasyylikontekstit voidaan ottaa käyttöön transkription alkamisessa, ja kaparakenteellinen mRNA saadaan valmiiksi transkription päätyttyä. Nykyiset kolmannen sukupolven kapasyylikontekstit voivat välttää käänteisen kiinnityksen ja lisätä suoraan Cap 1 -rakenteen transkription tuotteeseen.

Huomioon ottaen mRNA:n elinkaariset immunogeneettiset ominaisuudet ja käännösasteen tehokkuus, IVT-prosessissa käytetään usein joitakin muunneltuja NTP:itä, ja yleisiä muunneltuja nukleotideja ovat pseudouriidiini (Ψ), N1-metyyli-pseudouriidiini (N1Ψ) ja 5-metyylisytoosiini (5mC).

undefined

undefined

Kuva: Kaavio mRNA:n ko-transkriptionaalisesta ja kiinnitysreaktiosta

Palvelun yksityiskohdat

Palvelu

Palvelun yksityiskohdat

Toimitusaika (työpäivä)

Ko-transkriptionaalinen kappaus

In vitro -transkriptionaalinen vastaus (Clean Cap analog) 1-2
Nukleotiidimuokkaukset (Ψ/N1Ψ/5mC)
DNA-mallin poisto (DNase I)

IVT-olosuhteiden optimointi - valinnainen

Reaktiokomponenttien suunnittelu ja optimointi 3-7
Ominaisuutemme
  • Monipuoliset nukleotiidimuokkaussuunnitelmät

Useita valinnaisia nukleotiidimuokkausstrategioita voidaan käyttää parantaakseen proteiinin esitystä.

  • Optimoitu reaktiosysteemi

Saavuta korkea transkriptioverhontosuhde ja korkea kappaleiden tehokkuus.

  • Vakaa kappaleprosessi

Saavuta kappaleiden suhde yli 95 %.

  • Tiukka RNase-kontrolli

Estä mRNA:n hajoaminen tehokkaasti tiukasti kontrolloimalla RNasea kokeellisessa ympäristössä ja kulutuksissa.

Tapaustutkimus

Yaohai Bio-Pharma on kehittänyt kypsyneen yhteistranskription kappaleprosessin alustan, jossa käytetään puhdasta kappeleena vastaavaa aineistoa lisätäkseen Cap1-rakenne suoraan samalla kun vältetään käänteinen kappale. Standardoidun näyteesikäsittelyn ja kapillaarielektroforeesin (CE) havainnoinnin jälkeen vahvistetun vihreän fluoresoivien proteiinin (eGFP) mRNA:n kappaleiden suhde voi saavuttaa yli 95 %:n.

图片图片

eGFP mRNA:n kappaleiden tehokkuus yli 95 %

Yhteistranskription kappaleilla valmistettu eGFP mRNA ja mCherry mRNA siirretään erikseen 293T-soluihin, ja vahva fluoresoiva signaali havaitaan 48 tunnin kuluttua, mikä osoittaa, että mRNA ilmaantuu tehokkaasti 293T-soluihin.

图片

EGFP mRNA:n ja mCherry mRNA:n ilmaantuminen 293T-soluissa

Hanki Ilmainen Tarjous

Get in touch