Biologiset ainekset ovat monimutkaisia isoja molekyylejä, jotka ovat erityisen herkkää ympäristötähteille: lämpötilalle, oksidoinnille, valolle, ionisisällölle ja vajottamiselle. On ratkaisevan tärkeää suorittaa vakausselvityksiä sekä ainekkeelle että valmisteelle suunnitelluissa varastointiehdoissa, kiihdytettyissä ehdoissa ja pakotetuissa hajoamisoloissa. Vakausdatan käytetään yleensä tukemaan hyllyelämää, vanhentumispäivämäärää ja varastointiehdoista.
Noudattaen ICH Q5C ohjeistusta, Yaohai Bio-Pharma tarjoaa vakausselvityspalveluita proteiineille, pepteideille, plasmideille ja mRNAlla, jotka sisältävät pitkäkestoisia vakausselvityksiä, kiihdytettyjä vakausselvityksiä ja pakotetuista hajoamisselvityksistä. Lisäksi meillä on kaikki tarvittavat kyvyt näytevarastoimiseen ja Kriittisten Laatuominaisuuksien (CQA) analyysiin vakausdatan keräämiseksi.
Säädölliset vaatimukset vakausselvityksille
ICH Q5C -ohjeen mukaan: ”Käyttökelpoisuutta, purettomuutta ja laatua vaikuttavien monien ulkoisten olosuhteiden vuoksi bioteknologisille/biologisille tuotteille tulisi kehittää asianmukaisia tukitietoja. On myös vahvasti suositeltavaa, että tutkimuksia tehdään lääkeaineesta ja valmista lääkkeestä kiihtyvissä ja stressiolosuhteissa.”
Todellinen (pitkäkestoinen) käyttökelpoisuustutkimus
Todellisen (pitkäkestoinen) käyttökelpoisuustestauksessa lääkeainetta tai valmista lääkettä säilytetään suunnitelluissa varastointehtoissa ja seurataan, kunnes biologiset ominaisuudet muuttuvat hyväksyttävien rajojen yli. Pitkäkestoisista käyttökelpoisuustutkimuksista saatujen tulosten perusteella voidaan määrittää hyllyelämä, voimistumispäivämäärä, varastointiehdot sekä otanta/testausvälit.
Taulukko 1. Testausten taajuus pitkäkestoisissa käyttökelpoisuustutkimuksissa hyväksymisen ennen biologisille tuotteille
| Parasta ennen |
Testausvälit |
Ajankohtaiset pisteet |
| yksi vuosi tai vähemmän |
Kuukausittain ensimmäisten kolmen kuukauden ajan;
Joka kolmas kuukausi sen jälkeen
|
Ajankohdissa 0, 1, 2, 3, 6, 9 ja 12 kuukautta |
| Yli 1 vuosi |
Joka 3 kuukautta ensimmäisellä vuodella;
Joka 6 kuukautta toisella vuodella;
Vuosittain sen jälkeen
|
Kuukausina 0, 3, 6, 9, 12, 18, 24, 36 ja vuosittain sen jälkeen |
Kiihdytetty vakaudetutkimus
Injektoiden biolääkkeiden suositeltu varastointilämpötila on yleensä välillä 2–8 ℃. Kiihdytettyjä vakaudetutkimuksia tehdään lyhyemmällä ajalla kiihdytetyissä olosuhteissa, kuten korkeassa lämpötilassa. Vakaustiedot tunnustetaan tuenavana tietona tuotteen vakaudesta ja ne käytetään laajalti hyllyelämän ja voimassaolon päivämäärän määrittelyssä sekä kaavauksen kehityksessä.
Taulukko 2. Esimerkkejä kiihdytetystä vakaudetutkimuksesta
| Vakaumuututkimukset |
Kiihdytettyjä olosuhteita |
Näyteottopisteet |
| Kiihdytetty vakaudetutkimus |
korkeampi lämpötila
suhteellinen kosteus
|
Kuukausina 0, 1, 2, 3, 6 |
Pakottuneet hajoamistutkimukset
Pakotetun hajoamistutkimuksen tavoitteena on kerätä vakauden tiedot stressitilanteissa, kuten korkeassa lämpötilassa, ilmankosteudessa, valossa, oksidoinnissa, jäännös-hajoaminen tai mekaanisessa stressissä (kastelu, leikkaus). Lääkeaineen tai lääkkeen pakotetut hajoamistutkimukset äärimmäisissä olosuhteissa voivat auttaa tunnistamaan avaintekijät/parametrit, jotka johtavat biologisten yhdisteiden hajoamiseen. Tämä data on hyödyllistä vahvuuden arvioinnissa kaavan ja valmistusprosessin osalta.
Taulukko 3. Esimerkkejä pakotetuista hajoamistutkimuksista
| Jännitys |
Stressiolosuhteet |
Kestoaika |
| Lämpötila |
Korkea lämpötila (esim., 25℃, 30℃, 37℃, 40℃) |
Päiviä-kuukausia |
| Kosteus |
Ilmankosteus (0~100%) |
Päiviä-kuukausia |
| Kevyt |
Vähintään 1,2 miljoonaa lx tuntia ja 200 W tuntia/m2 |
Useita päiviä |
| Jäätymis-hajoaminen |
jäätymis–hajoaminen (lämpötilasta -20℃, -80℃ asti 15℃) |
1~5 kierrosta |
| Sekoitus, hirisevyys |
50~500 ka/v |
Tunteja-päiviä |
Analytiikka menetelmät tukevat vakauden tutkimuksia
| Kriittiset laatuominaisuudet (CQAs) |
Analyttiset menetelmät |
| Kokonaisproteiinin sisältö |
UV, BCA, Bradford, Lowry |
| Näkyvät hiukkaset |
Visuaalinen tarkastus |
| Aggregaatio, fragmentit |
Dynaaminen valoisirakoja Kokoeristymäkromatografia (SEC) HPLC/UPLC, Kapillaariekstrofoosi CE (CGE, CZE, cIEF/iCIEF), Epävähennys SDS-PAGE |
| Peptidikarttaus ja sekvenssi |
LC-MS/MS |
| Disulfidiparit |
LC-MS/MS |
| PTM (oksidointi, isomerisaatio, deamidointi, glykosylointi) |
LC-MS/MS |
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
