N-glykosylaatiokohdan analyysi on ratkaisevan tärkeä glykaanien toimintojen ymmärtämiseksi. Yaohai Bio-Pharma käyttää nestekromatografia-massaspektrometriaa (LC-MS) N-glykosylaatiokohdan entsymaattisen katkaisun jälkeen.
Olemme olleet mukana erilaisten suurten molekyylien proteiinirakenteen karakterisoinnissa, mukaan lukien rekombinanttialayksikkörokotteet, nano-aineet/VHH:t/ yhden domeenin vasta-aineet (sdAb), vasta-ainefragmentit, hormonit/peptidit, sytokiinit, kasvutekijät (GF), entsyymit, jne.
N-glykosylaatiopaikan sääntelyvaatimukset
ICH Q6B -ohjeen mukaan "glykoproteiinien hiilihydraattipitoisuus (neutraalit sokerit, aminosokerit ja siaalihapot) määritetään. Lisäksi hiilihydraattiketjujen rakenne, oligosakkaridikuvio (antennaarinen profiili) ja polypeptidiketjun glykosylaatiokohta(t) analysoidaan mahdollisimman laajasti.
Analyyttinen menetelmä
analyysi |
Menetelmät |
N-glykosylaatiokohta |
Nestekromatografia-massaspektrometria (LC-MS) entsymaattisen katkaisun jälkeen |
Menettelyt
1. Proteiinin entsyymidigestio käyttämällä trypsiiniä tai muuta proteaasia
2. Erottele glykopeptidien fragmentteja
3. Vahvista N-glykosylaatiokohta LC-MS:llä
4. Analysoi tiedot