Strain screeningin merkitys
Kelpaavien isäntien valinta on välttämätöntä biologisten lääkkeiden CMC-kehityksessä, mikä määrittää tuotteen ja valmistusprosessin laadun ja yhtenäisyyden. Isännän valinnan suora tavoite on tarjota ehdokas ensisijaiselle solupankille (PCB), jolla on korkea ilmaisuaste ja korkea vakaus sekä kautta- että varastovakaudessa. Kelpaavan isännän valinta on välttämätöntä kahdesta pääasiallisesta syystä:
- Ensinnäkin valita mikrobilainen isäntä, jolla on korkea ilmaisuaste. On olemassa useita kaupallisia sailytyksiä, joita käytetään erilaisten tyypin proteiinien ilmaisemiseen, kuten myrkyllisten proteiinien, ratkoettavien proteiinien tai eukaryottisten proteiinien ilmaisemiseen.
- Toiseksi valita isäntä, jolla on geneettinen vakaus. Geneettisen vakaumuksen testaus on keskeinen seikka koko tuotantokierteen ajan. Suositellaan, että korkea geneettinen vakaus tunnustetaan toisena avaimellisena ominaisuutena sopivan sailytyksen osalta.
Avainsanat: mikrobien lajinsuodatus, mikrobien lajinvalinta, korkean läpimäärän bakteerisuodatus tai hiivien suodatus, korkean tuotannon lajin suodatus, erittäin vakauden suodatus, genetiikalisesti vakaa lajin suodatus Sovellus: ihmislääketiede, eläinlääketiede, rokote, synteettinen biologia, rekombinoitu suuri molekyyli-biologiset, biologiset reaagentit
Yaohai Bio-Pharm:n Lajinsuodatuspalvelut
Yli 10 vuoden kokemuksen hyödyntämisen jälkeen mikrobiologisten biologisten aineiden CDMO:ssa, tuemme erilaisten suurten molekyylien kehitystä ja valmistusta, mukaan lukien rekombinoimat alayksikkörokotteet, viruskaltaiset osittaudut (VLP), hormonit (insuliini, GLP-1, kasvuhormoni), sitokiinit (Interleukin-2/IL-2, IL-15, IL-21), kasvatekijät (EGF, FGF, NGF), nanokroppien/tunnepidäteiden (sdAbs) sekä enzyymien.
Olemme kertyttäneet runsaasti kokemusta erilaisten plasmidivektorien ja mikrobien isäntien valinnassa, mukaan lukien bakteerit Escherichia coli (E. coli), ja hiivi Pichia pastoris (P. pastoris), Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae), Hansenula polymorpha (H. polymorpha). Voimme löytää parhaan ilmaisujärjestelmän yksilöllisille biologisille tuotteillesi.
Olemme keränneet erilaisia mikrobisia isäntöjä selkeällä lähteellä ja standardilla CoA:lla, mukaan lukien E.Koli ilmaisu ja torjuntailmaisu.
Palvelun yksityiskohdat
|
Palvelut
|
Palvelun yksityiskohdat
|
Vähimmäisaika/päivä
|
Toimitteet
|
|
Kantasoluksen rakentaminen (E. coli)
|
Plasmidin transforormaatio (moni-isännöissä)
|
5
|
CoA kaupallisten isännöiden raportti kanasoluksen rakentamisesta
|
|
PCR-verifikaatio
|
|
Sukupuhtauden puhdistus
|
|
Sukupuhtauden säilyttäminen
|
|
Sukupuun rakentaminen (hiivalevy)
|
Kuntoisten hiivalevyjen solujen valmistus
|
10
|
|
Plasmidin linearisointi
|
|
Elektrotransformaatio
|
|
Vastus/Nutrienttivajeiden testaus
|
|
Sukupuhtauden puhdistus
|
|
Sukupuhtauden säilyttäminen
|
|
Kelpaavan ison testaus
|
Plasmidi tai genomisen DNA:n extraktio
|
15-20
|
Isäntäkuorman testausprosessi COA muokatuista pitoisuuksista
|
|
PCR-verifikaatio, rajoitusensiymi-digeesointi
|
|
Kohdegeenin sekvensointi
|
|
Korkean ilmaisun isäntien valitseminen
|
|
Isäntien valitseminen geneettisesti vakaina
|
|
Sukupuhtauden säilyttäminen
|
Tapaustutkimus
Sopiva isäntä parantaa proteiinin ilmaisutasoa 2,5 kertaa.
meille on annettu tehtävä kehittää korkeakapasiteettinen E. coli pitoisuus. Ja yritimme kolmea erilaista kaupallista E. coli isäntää, ottaen huomioon kohdeproteiinin ominaisuudet. Tulosten mukaan pitoisuudet S1-1 ja S1-2 (Kuva A: Rivi 1,2) paransivat proteiinin tasoja 3,5 kertaa verrattuna asiakkaan alkuperäiseen pitoisuuteen (Kuva A: Rivi 3).
Lisäksi pitoisuus S1-1 osoitti korkeaa geneettistä vakautta (Kuva B), ja sitä tunnustettiin ensisijaiseksi solubankki-kandidaatiksi (PCB).
Palvelumme ominaisuudet
Osoittanut asiantuntemusta erilaisten mikrobien isäntien kanssa, esimerkiksi E. coli DH5α, TOP10, Trans10, BL21; P. pastoris SMD1168H, X-33, GS115, PichiaPink -ryhmä 1/2/3/4; S. cerevisiae ja H. polymorpha .
Olemme kokeneita E. coli periplaasmallisen siirtoaineen, ratkeavan ja inklusiokappaleiden ilmaisemisesta sekä jeksi intrasellulaarisesta tai siirtoaineen ilmaisemisesta. Emme lisää antimykoteja tai lisäämme niitä sääntelyviranomaisten ohjeiden mukaisesti.
Olemme perustaneet korkean läpimääräyksen alustan valita korkean tuotannon ja vakaiden pilkkujen valitsemiseksi yli sadasta ehdokaspilkkua.
On varmistettu, että jännitysingeniörin ja valintaprosessin jäljittely on toteutettu hyvän datan ja tietueen hallinnan mukaisesti.
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
