Keskeisen dogman mukaan lähetti-RNA (mRNA) on silta geneettisen materiaalin siirtymiselle DNA:sta proteiineihin.
mRNA:lla on biologinen rooli koodaamalla proteiineja in vivo, ja kypsä mRNA eukaryoottisissa organismeissa koostuu viidestä komponentista: 5' Cap (cap-rakenne), 5' UTR (ei-koodaava alue), ORF (avoin lukukehys), 3ʹ UTR. ja 3' polyA-häntä (polyadenylaattihäntä).
Palvelujen tiedot
| Käsitellä asiaa |
Valinnainen palvelu |
Palvelun yksityiskohdat |
Toimitusaika (päivä) |
| mRNA-sekvenssin suunnittelu ja optimointi |
Koodaussekvenssien suunnittelu ja optimointi |
CDS-sekvenssin kohdistus
CDS-kodonin optimointi
|
1 |
| Ei-koodaavien sekvenssien suunnittelu ja optimointi |
5' UTR-sekvenssin suunnittelu ja optimointi
3' UTR-sekvenssin suunnittelu ja optimointi
polyA-sekvenssin suunnittelu ja optimointi
|
1-2 |
Muokattavat vaihtoehdot
| 5' UTR/3' UTR |
- Luonnon UTR-sekvenssi
- Mutantti/Engineered UTR-sekvenssi
|
| 3' PolyA Tail |
- 100A ~ 120A Tail (suositus)
- Segmentoitu polyA-häntä
- Muu Custom tail
|
Yhteiset strategiat mRNA-sekvenssisuunnittelulle
| mRNA-komponentit |
Biologiset toiminnot |
Optimointistrategiat |
| 5' Cap |
Suojaa mRNA:ta eksonukleaasien aiheuttamalta hajoamiselta ja toimi yhdessä polyA-hännän 3'-päässä, polyA:ta sitovan proteiinin ja translaation aloitustekijäproteiinin kanssa proteiinin translaation aloittamiseksi. |
Luonnollinen Cap1-rakenne välttää muodontunnistusreseptoreita ja vähentää siten luonnollista immuunivastetta, joka voidaan saavuttaa yksivaiheisella yhteistranskription katkaisulla tai kaksivaiheisella entsymaattisella katkaisulla [katso mRNA:n entsymaattinen rajoitus ja yhteistranskription kappaus]. |
| 5' UTR |
Ribosomit voivat tunnistaa 5' UTR:n, säädellä mRNA:n translaatiota ja vaikuttaa mRNA:n stabiilisuuteen. |
Sisältää Kozak-sekvenssejä ilman erittäin vakaata toissijaista rakennetta. Voimakkaasti ilmentyneiden geenien luonnolliset UTR:t ovat edullisia in vitro -transkription (IVT) mRNA:ille, kuten a-globiinille ja p-globiinille. |
| CDS |
Proteiinia koodaavat alueet ja koodaavat sekvenssit antigeeneille, vasta-aineille tai muille toiminnallisille proteiineille. |
Kodonin optimointi lisää translaation tasoa, mikä huomauttaa, että tietyillä ei-optimaalisilla kodoneilla voi olla rooli proteiinin laskostumisessa. |
| 3' UTR |
Säädä mRNA:n translaatiota ja stabiilisuutta. |
Korkeasti ilmentyneiden geenien luonnolliset UTR:t ovat edullisia IVT-mRNA:ille, kuten a-globiinille ja p-globiinille. |
| 3' polyA häntä |
Säädä proteiinin ilmentymistä ja suojaa korkin rakennetta hajoamiselta. |
Riittävä pituus (100-150 bp) vaaditaan; polyA-häntä koodaava transkriptiotemplaattiplasmidissa varmistaa tarkemmin määritellyn polyA-hännän pituuden. |
Ominaisuuksemme
- Monipuolinen UTR-lähdevalinta
Useita erittäin ilmentyneiden luonnollisten ja modifioitujen UTR-kirjastojen lähteitä; kypsä UTR-muokkausstrategia;
- Huippuluokan CDS-optimointitiimi
Tee yhteistyötä ammattimaisen AI-algoritmitiimin kanssa kodonien optimoinnin loppuunsaattamiseksi.
- Tasainen polyA-häntäjakauma
Lisää polyA-sekvenssejä DNA-templaattien mukaisesti kontrolloidaksesi tarkemmin mRNA:n pituutta.
- Monipuoliset optimointiyhdistelmät
Saavuta mRNA:n tehokas ekspressio alhaisella immunogeenisyydellä.
Tapaustutkimus
Kaksoisreportteri-mRNA:n sekvenssisuunnittelu: mCherry-eGFP mRNA
Yaohai Bio-Pharman mRNA-palvelua kehitetään edelleen suunnittelemalla ja optimoimalla kaksoisreportterigeenin tandemsekvenssi, joka mahdollistaa kaksoisgeenien yhteisilmentymisen.
Käyttämällä tavanomaista transfektioreagenssia kaksoisgeenin tandemsekvenssi mCherry-eGFP mRNA transfektoidaan 293T-soluihin, ja kaksi fluoresoivaa signaalia mCherrystä (punainen) ja tehostetun vihreän fluoresoivan proteiinin (eGFP) havaitaan samanaikaisesti ilmentymisen kanssa 48 tunnin kuluttua, ja pinottu. kaavio on korostettu keltaisella.
mCherry-eGFP mRNA:n ilmentyminen 293T-solussa
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
EI
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
