In vitro-transkriptioon (IVT) mRNA:lle tarvitaan linearisoitua plasmidi-DNA:a transkriptioksi IVT:lle T7 RNA-polymeraasin avulla. Korkealaatuisen plasmidi-DNA:n käyttö on ratkaiseva in vitro-transkriptiolle.
Kokemukseen perustuen plasmidien valmistamisen palvelualustalla Yaohai Bio-Pharma tarjoaa high-purity, korkeakorkeuden linearisoituja plasmidi-DNA-valmistuspalveluita tehokkaan IVT-transkription saavuttamiseksi.
Palveluiden yksityiskohdat
| Prosessi |
Valinnaiset palvelut |
Palvelun yksityiskohdat |
Toimitusaika (työpäivä) |
| Kiertyvän plasmidin valmistus |
Geeninsynteesi |
Geenisynteesi (kolmannen osapuolen kanssa) |
7-10 |
| Plasmidin lisääntyminen |
Plasmidin lisääntyminen |
2 |
| Plasmidin eristys |
| Lineaarisen plasmidiin valmistaminen |
Plasmidin linearisointi ja puhdistus |
Plasmidin linearisointi |
1 |
| Linearisoitunut DNA-puhdistus |
| Plasmidin DNA-laadun valvonta |
Konsentraatio ja puhtaus |
Ultraviolettispektrometria (UV) |
1-2 |
| Plasmidin konformaatio |
Agarosegelelektroforeesi (AGE) |
| Kapillaarielektroforeesi (CE) - valinnainen |
| Plasmidi tunnistaminen |
Rajoitusensiimi-tunnistus/AGE |
Ominaisuutemme
Joustava linearisointimenetelmien valinta
DNA-eristämisen ja puhdistamismenetelmien optimointi korkeiden tuottavuuden saavuttamiseksi.
Tiukat prosessin hallintakriteerit, tutkimustarkoituksiin tarkoitettujen plasmidien superhelikaalinen muoto on yli 80%.
- Kehittynyt alustaprosessi
Korkean standardin ja tehokkaiden plasmidien valmistus- ja laadunvalvontapalveluita kokeiluntarpeiden täyttämiseksi.
Tapaustutkimus
Ottaen esimerkiksi Yaohai Bio-Pharm:n luettelotuotteen mRNA_luciferase, transkriptio-malliplasmidisammonta (tutkimustaso) on superhelikaalinen suhde yli 90%, linearisaatioaste lähellä 100% ja seuraava transkriptioaste saavuttaa suhteen 1:200 (linearisoitu plasmidi DNA:mRNA).
MRNA_luciferase, joka saadaan lineaarisen plasmidin valmistuksen kautta mallina, transfektoidaan 293T-soluihin, ja enzymi-substraatti-reaktion aktiivisuus arvioidaan 24 tuntia transfektion jälkeen.
On mahdollista havaita selvä voimakas luciferase-aktiivisuuden signaali, eli luciferase-proteiini ilmaantuu tehokkaasti, mikä osoittaa, että transkriptiomallin puhtaus voi täysin täyttää vaatimuksen korkealaatuisen mRNA:n valmistamisesta.
Ylärakenneplasmidi-suhdeanalyysi
Luciferase-mRNA-ilmaannuksen vahvistaminen in vitro
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
