In vitro -sykloinnin ja RNase R -rikastuksen tuotteet vaativat lisäksi poistamista in vitro -transkriptaatiosta (IVT), mukaan lukien syklointireaktiossa käyttämättömät alkuaineet, reaktioiden sivutuotteet ja rikkoutuneet RNA:t.
Yaohai Bio-Pharmailla on kypsää LiCl -putoamismenetelmää, magneettisuolausmenetelmää, itse kehitettyä puhdistusta ja muita monipuolisia puhdistussuoria tehokkaasti poistaakseen erilaisia saasteita ja valmistaa korkean puhtauden circRNA.
Puhdistussuomi pienille määreille circRNA:a solujen transfektioon ja osana eläinkokeita.
Puhdistussuomi pienille määreille circRNA:a solujen transfektioon ja osana eläinkokeita.
Korkeampi laatuvaatimuksissa olevat käyttötarkoitukset;
Vakaa ja skaalautuva puhdistusprosessi täyttääkseen GMP -tuotannon vaatimukset.
Prosessi | Valinnaiset palvelut | Palvelun yksityiskohdat | Toimitusaika (päivä) | Toimitteet |
circRNA-purifiointi | Perinteinen suodatusratkaisu | Litiumkloriidiputoituminen | 1 | circRNA-lääkeaine |
Magneettisten perhonen käyttöön perustuva puhdistus | ||||
Erittäin puhtaan circRNA-purifiointi | Valmistava korkean suorituskyvyn nesteseparointi (HPLC) | 1-2 | ||
Puskentajan vaihto | Ultrasuodatus | 1 | ||
circRNA-laadunvalvonta | Keskittäminen/purifiointi | Ultraviolettispektrometria (UV) | 0.5 | Testiraportti |
Puhtaus | Agrariogeleelektroforeesi (AGE)/E-gel | |||
HPLC-valinnainen | 1 |
Sovellusnäyttö voidaan saavuttaa.
circRNA yli 90%:n puhdas;
Tiukasti valvomalla RNaseja kokeellisessa ympäristössä ja kulutuksissa RNA:n hajoaminen estetään tehokkaasti.
Yaohai Bio-Pharma on kehittänyt kypsän circRNA-purifikaattoriratkaisun, joka pystyy tehokkaasti poistamaan erilaiset prosessiin liittyvät saasteet.
Perinteisen ratkaisun avulla purifioidut ciRNA-tuotteet sekoittuvat vielä selvästi katkennutuneella RNA:lla ja introneilla.
Yaohai Bio-Pharmalla kehitetyllä purifikaattorilla erilaiset lineaariset RNA-saasteet, kuten katkennutunut RNA ja intronit, voidaan menestyksekkäästi poistaa.
circRNA-ilmauksen vahvistaminen
Käyttämällä perinteistä liposomiin, eGFP circRNA transfektoidaan 293T-soluihin, ja fluoresenssisignaali havaitaan 24 tunnin kuluttua ja jatkuu vahvistumaan 48 tunnin kuluttua. Floresenssisignaali voidaan edelleen havaita seitsemännessä ja neljätoista päivänä transfektion jälkeen.