Jännitysseulonnan merkitys
Sopivien isäntien seulonta on välttämätöntä biologisten CMC-kehitysten kannalta, mikä määrää tuotteen ja valmistusprosessin laadun ja johdonmukaisuuden. Isäntäseulonnan suorana tavoitteena on tarjota ehdokas primaarisolupankki (PCB), jolla on korkeat ilmentymistasot ja korkea stabiilisuus sekä siirrosstabiilisuuden että varastointistabiilisuuden suhteen. Sopivan isännän seulonta on tarpeen kahdesta pääasiallisesta syystä:
- Ensinnäkin valita mikrobi-isäntä, jolla on korkea ilmentymistaso. On olemassa useita kaupallisesti saatavilla olevia kantoja, joita käytetään erityyppisten proteiinien, kuten myrkyllisten proteiinien, liukoisten proteiinien tai eukaryoottisten proteiinien, ilmentämiseen.
- Toiseksi seuloa isäntä geneettisesti vakaasti. Geneettisen stabiilisuuden testaus on keskeinen kohta koko tuotannon elinkaaren ajan. On ehdotettu, että korkea geneettinen stabiilius tunnistetaan sopivan kannan toiseksi keskeiseksi ominaispiirteeksi.
Avainsanat: mikrobikantojen valinta, mikrobikantojen seulonta, bakteerien tai hiivan suuritehoinen seulonta, korkeatuottoisten kantojen seulonta, erittäin stabiilien kantojen seulonta, geneettisesti stabiilien kantojen seulonta Sovellus: ihmislääketiede, eläinlääketiede, rokote, synteettinen biologia, rekombinantti suuri molekyyli biologiset aineet, biologinen reagenssi
Yaohai Bio-Pharman kantaseulontapalvelut
Hyödyntämällä yli 10 vuoden CDMO-kokemusta mikrobibiologiassa, tuemme erilaisten suurten molekyylien kehitystä ja valmistusta, mukaan lukien rekombinanttialayksikkörokotteet, viruksen kaltaiset partikkelit (VLP), hormonit (insuliini, GLP-1, kasvuhormoni), sytokiinit ( Interleukiini-2/IL-2, IL-15, IL-21), kasvutekijät (EGF, FGF, NGF), nanoaineet/yksidomeenivasta-aineet (sdAb), entsyymit jne.
Meillä on runsaasti kokemusta erityyppisten plasmidivektoreiden ja mikrobiisäntien, mukaan lukien bakteerien, valinnasta. Escherichia coli (E. coli), ja hiivaa Pichia pastoris (P. pastoris), Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae), Hansenula polymorpha (H. polymorpha). Voimme löytää parhaan ilmentämisjärjestelmän ainutlaatuisille biologeillesi.
Keräsimme erilaisia mikrobiisäntiä, joissa oli selkeät lähteet ja standardi CoA, mukaan lukien E.coli ekspressio ja hiivailmaisu.
Palvelun yksityiskohdat
|
Palvelut
|
Palvelun yksityiskohdat
|
Minimiaikajana/päivä
|
Tuotokset
|
|
Kantarakenne (E. coli)
|
Plasmidin muunnos (useita isäntiä)
|
5
|
Kaupallisten isäntien aitoustodistus Kantarakennusraportti
|
|
PCR-varmennus
|
|
Kantojen puhdistus
|
|
Kantojen säilytys
|
|
Kantarakenne (hiiva)
|
Pätevien hiivasolujen valmistaminen
|
10
|
|
Plasmidin linearisointi
|
|
Sähkömuunnos
|
|
Resistenssin/ravitsemuksellisen puutteen seulonta
|
|
Kantojen puhdistus
|
|
Kantojen säilytys
|
|
Sopiva isäntäseulonta
|
Plasmidin tai genomin DNA:n uuttaminen
|
15-20
|
Isäntäseulontaprosessi Muokattujen kantojen COA
|
|
PCR-todentaminen, restriktioentsyymidigestio
|
|
Kohdegeenin sekvensointi
|
|
Korkean ilmentymän isäntien seulonta
|
|
Geneettisesti stabiilien isäntien seulonta
|
|
Kantojen säilytys
|
Tapaustutkimus
Sopiva isäntä parantaa proteiinin ilmentymistasoa 2.5 kertaa.
Meille on annettu tehtäväksi kehittää korkeatuottoisia E. coli rasitusta. Ja kokeilimme kolmenlaisia mainoksia E. coli isäntiä kohdeproteiinin ominaisuuksien perusteella. On osoitettu, että kanta S1-1 ja S1-2 (kuvio A: kaista 1,2, 3.5) paransi proteiinitasoa 3-kertaiseksi kuin asiakkaan alkuperäinen kanta (kuvio A: kaista XNUMX).
Lisäksi kannalla S1-1 oli korkea geneettinen stabiilius (kuva B), ja se tunnistettiin ehdokaskanta primääriseen solupankkiin (PCB).
Palvelumme ominaisuudet
Osoitettu asiantuntemus erilaisista mikrobiisännistä, esim. E. coli DH5a, TOP10, Trans10, BL21; P. pastoris SMD1168H, X-33, GS115, PichiaPink-kanta 1/2/3/4; S. cerevisiae ja H. polymorpha.
Meillä on kokemusta E. coli periplasminen eritys, liukoisen ja inkluusiokappaleen ilmentyminen sekä hiivan solunsisäinen tai eritysekspressio. Emme lisää antibiootteja tai lisäämme antibiootteja viranomaisten ohjeiden mukaisesti.
Perustamme korkean suorituskyvyn seulontaalustan, jolla seulotaan tehokkaasti tuottavat ja vakaat kannat yli sadasta ehdokaskannasta.
Hyvän datan ja tietueen hallinnan alaisena varmistetaan, että kantojen suunnittelu- ja seulontaprosessi on jäljitettävissä.
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
EI
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
