Tagejen poisto proteaasit
Jotta rekombinantien proteiinien hajoamattomuutta voidaan parantaa ja puhdistusprosessia yksinkertaistaa, tutkijat lisäävät usein fuusiopainimerkkejä, joista His-tag, maltose-binding protein (MBP) ja glutathione-S-transferase (GST) ovat yleisesti käytettyjä.
Vaikka painimärkki on merkitty ylimääräisenä proteiinin jonona, sen tulisi poistua biologisen aktiivisuuden säilyttämiseksi lääkeyritysten kannalta. Fuusiopainimerkkiä varten tarvitaan paikkakohtaisia proteaaseja, kuten enterokinasta (EK), trombiinia, tupakoiden leikintäviirusproteasa (TEVp), ihmisen rhinovirusproteasa 3C (HRV3C), pieni ubiquitiinimuokkausproteiini (SUMO) proteasa, tupakoiden venytmääräviirusproteasa (TVMV) ja carboxypeptidasi A/B (CPA/CPB).
TYYPPİ
|
Enzymi
|
Tunnistuspaikka
|
Tagin poiston sisäinen proteaasi
|
Enterokinasi (EK), enteropeptidasi
|
DDDDK↓
|
Trombiini
|
LVPR↓GS
|
TEV-proteaasi
|
ENLYFQ↓G
|
HRV3C-proteaasi
|
LEVLFQ↓GP
|
SUMO proteaasi
|
SUMO teraarinen rakenne
|
TVMV proteaasi
|
ETVRFQG↓S
|
Tagin poisto exopeptidit
|
Carboxypeptidasi A (CPA)
|
C-terminaaliset aminohapaat, paitsi Pro, Lys ja Arg
|
Carboxypeptidasi B (CPB)
|
C-terminaaliset Lys ja Arg
|
Muut proteaasit
SOVELLUS
|
Enzymi
|
Toiminto
|
Muut proteaasit
|
Proteasa K
|
Serini proteasa, joka hajoittaa proteiineja hydrolysoimalla peptidiyhteyksiä.
|
IdeS, IgG proteasa
|
IgG-hajoittavat enzymit (Ides), jotka leikkaavat immunoglobuliinissa G (IgG) tietyssä paikassa, tuottamalla Fab- ja Fc-fragmentteja
|
IgA1-proteasa
|
Proteolyttinen enzyymi, joka leikkaa tiettyjä kohtia ihmisen immunoglobuliini A1:n (IgA1) vaipasekvenssissä.
|
Nukleasa
SOVELLUS
|
Enzymi
|
Toiminto
|
Nukleasa
|
Nukleasa
|
Hajoittaa nucleinsavoja (DNA tai RNA) hydrolysoimalla fosfodiesteriyhteyksiä.
|
Rajoittava enzyymi
|
Endonuklease, joka leikkaa DNA:a tai sen lähellä tiettyjä kohtia.
|
Amidasi
SOVELLUS
|
Enzymi
|
Toiminto
|
Amidasi
|
PNGase F
|
Leikkaa sisimmän GlcNAc:n ja asparagiiniresiittien välillä korkeassa mannoseessa, hybridi- ja kompleksiosakarheissa.
|
Yaohai Bio-Pharma tarjoaa yhdenmukaisen CDMO-ratkaisun enzymireaagentteille