همه دسته بندی ها
ENEN
آنزیم های نوترکیب

آنزیم های نوترکیب

صفحه اصلی >  آنزیم های نوترکیب

کاربرد

آنزیم های نوترکیب

آنزیم نوترکیب برای استفاده درمانی

آنزیم های درمانی به دست آمده از طریق فرآیندهای بیوتکنولوژیکی به طور گسترده برای چندین کاربرد بالینی از جمله درمان جایگزینی آنزیم، تخریب متابولیت ها و سم انباشته شده، درمان سرطان و ویرایش ژنوم استفاده می شوند. چندین آنزیم درمانی را می توان در سیستم بیان میکروبی تولید کرد.

کاربرد آنزیم ماده محصولات / خطوط لوله معمولی
درمان جایگزین آنزیم آدنوزین دآمیناز، ADA آدنوزین یا دئوکسی آدنوزین Elapegademase-lvlr (Revcovi)
فنیل آلانین آمونیاک لیاز، PAL فنیل آلانین Pegvaliase-pqpz (Palynziq)
تخریب متابولیت های انباشته شده اوریکاز/اورات اکسیداز اسید اوریک Peglticase (Krystexxa) Rasburicase (Fasturtec)
کلاژناز "اسکار" کلاژن کلاژناز کلستریدیوم هیستولیتیکوم (Xiaflex، Qwo، Santyl)
پلاسمین انسانی کوتاه شده کلاژن، فیبرونکتین و لامینین اکوپلاسمین (جتریا)
فعال کننده پلاسمینوژن بافت کوتاه (tPA) پلاسمینوژن Reteplase (Retavase)
پروتئاز IgG ایمونوگلوبولین G (IgG) ایملیفیداز (Idefrix)
پروتئاز IgA ایمونوگلوبولین A (IgA) پروتئاز PKU308/AP308IGAN IgA
تخریب سم کربوکسی پپتیداز G2 متوتروکسات گلوکارپیداز (ووراکساز)
درمان سرطان آنزیم اختصاصی آسپاراژین آسپاراژین Asparaginase (Elspar) Calaspargase pegol-mknl (Asparlas)
ویرایش ژنوم نوکلئاز Cas9 ژن هدف Exagamglogene autotemcel (Exa-cel، CTX001)
آنزیم نوترکیب به عنوان ماده

چندین آنزیم در تولید RNA رمزگذاری طولانی مدت (مانند mRNA، saRNA، circRNA)، تولید ترکیبات آنتی بادی-دارو (ADCs) و غیره وجود دارد. آنزیم های تولید شده میکروبی مقرون به صرفه تر از سلول های پستانداران، به ویژه سیستم بیان E. coli هستند.

کاربرد آنزیم عملکرد
آنزیم برای تولید RNA خطی، بدون RNase اندونوکلئازهای محدود کننده خطی کردن DNA پلاسمید (pDNA) برای جلوگیری از تولید رونوشت طولانی تر.
RNA پلیمراز T7 (T7 RNAP) به پروموتر T7 متصل شود و رونوشت RNA خاص تولید کند. در طول واکنش رونوشت in vitro (IVT) نقش کلیدی بازی کنید.
آنزیم پوشاننده واکسینیا ساختارهای Cap را به انتهای 5' mRNA IVT اضافه کنید.
پیروفسفاتاز معدنی (iPPase) جلوگیری از پیروفسفات در طی واکنش IVT.
بازدارنده RNase، نوترکیب فعالیت RNase را در طی واکنش IVT مهار کنید.
DNase I الگوی DNA را بردارید.
آنزیمی برای تولید circRNA، بدون RNase RNase R RNA خطی را هضم کنید و RNA دایره ای را غنی کنید.
کونژوگاسیون گلیکان با واسطه آنزیم پپتید-N-گلیکوزیداز (PNGase F) پیوند آمیدی بین اولین ساکارید GlcNAc و زنجیره جانبی Asn297 را قطع می کند. گلیکان ها را از آنتی بادی های IgG آزاد کنید.
ترانس گلوتامیناز باکتریایی (BTG) برای تولید ADC ها، محموله های سایت را به طور خاص ترکیب کنید.
Sortase A بستن پروتئین ها را کاتالیز می کند.
β1,4،XNUMX-گالاکتوزیداز تمام گالاکتوزهای انتهایی را آزاد کنید و یک ایزوفرم G0 همگن از آنتی بادی تشکیل دهید.
β1,4،XNUMX-گالاکتوزیل ترانسفراز (Gal-T) یک باقیمانده قند را با یک گروه عملکردی واکنش پذیر شیمیایی منتقل کنید.
α2,6،XNUMX-سیالیل ترانسفراز (Sial T) بقایای اسید سیالیک نهایی را در ساختار گلیکان بومی یک آنتی بادی بگنجانید.
بازسازی و مهندسی گلیکان با واسطه آنزیم اندو-N-استیل گلوکوزامینیداز (ENGase) پیوند β1,4،1 گلیکوزیدی بین GlcNAcβ4-XNUMXGlcNAc N-گلیکان ها را هیدرولیز کنید. گلیکان های متصل به N در ناحیه Fc آنتی بادی های IgG را حذف کنید.
اندوگلیکوزیداز S (EndoS)
گلیکوزیل ترانسفرازها (GTs) N-گلیکان اگزازولین را به IgGهای دفوکوزیله منتقل کنید.
دیگران آنزیم های تولید شده توسط سویه میکروبی نیاز سفارشی
آنزیم نوترکیب به عنوان معرف
پروتئازهای حذف برچسب

تگ های فیوژن اغلب برای بهبود حلالیت و پایداری پروتئین های نوترکیب مورد علاقه و تسهیل خالص سازی آنها استفاده می شود. تگ های رایج مورد استفاده عبارتند از His-tag، پروتئین اتصال به مالتوز (MBP)، گلوتاتیون-s-ترانسفراز (GST) و غیره.

به طور معمول، یک توالی پیوند دهنده بین تگ فیوژن و توالی پروتئین هدف اضافه می شود تا برچسب حذف شود. حذف تگ های همجوشی به پروتئازهای خاص سایت مانند انتروکیناز (EK)، ترومبین، پروتئاز ویروس اچ تنباکو (TEVp)، پروتئاز راینوویروس انسانی 3C (HRV3C)، پروتئاز پروتئین اصلاح کننده کوچک یوبیکوئیتین (SUMO)، ویروس خالدار ورید تنباکو نیاز دارد. TVMV) پروتئاز و کربوکسی پپتیداز A/B (CPA/CPB).

نوع آنزیم سایت شناخت
حذف برچسب اندوپروتئازها انتروکیناز (EK)، انتروپپتیداز DDDDK↓
ترومبین LVPR↓GS
پروتئاز TEV ENLYFQ↓G
پروتئاز HRV3C LEVLFQ↓GP
پروتئاز SUMO ساختار سوم SUMO
پروتئاز TVMV ETVRFQG↓S
حذف برچسب اگزوپروتئازها کربوکسی پپتیداز A (CPA) اسیدهای آمینه C ترمینال، به جز Pro، Lys و Arg
کربوکسی پپتیداز B (CPB) C ترمینال Lys و Arg
سایر پروتئازها، نوکلئازها و آمیدازها
کاربرد آنزیم عملکرد
سایر پروتئازها پروتئاز K یک پروتئاز سرین که پروتئین ها را با هیدرولیز پیوندهای پپتیدی هضم می کند.
IdeS، پروتئاز IgG آنزیم های تجزیه کننده IgG (Ides) که در محل خاصی از ایمونوگلوبولین G (IgG) شکسته می شوند و قطعات Fab و Fc را تولید می کنند.
پروتئاز IgA1 یک آنزیم پروتئولیتیک که محل خاصی را در توالی ناحیه لولا ایمونوگلوبولین A1 (IgA1) انسانی می شکافد.
هسته ای هسته ای اسیدهای نوکلئیک (DNA یا RNA) را با هیدرولیز پیوندهای فسفودی استر می شکند.
محدود کردن آنزیم اندونوکلئازی که DNA را در محل های خاص یا نزدیک آن می شکافد.
آمیداز PNGase F بین داخلی ترین N-استیل گلوکزامین (GlcNAc) و آسپاراژین باقی مانده های مانوز بالا، هیبرید و الیگوساکاریدهای پیچیده شکاف می دهد.
Yaohai Bio-Pharma راه حل CDMO یک مرحله ای را برای آنزیم های نوترکیب ارائه می دهد
  • مهندسی سویه میکروبی و غربالگری
  • بانکداری سلولی میکروبی (PCB/MCB/WCB)
  • توسعه فرآیند بالادستی
  • توسعه فرآیند پایین دستی
  • توسعه فرمول بندی
  • تولید GMP
  • پر کردن و پایان
  • تحلیلی و آزمایشی
  • امور نظارتی
مرجع:

[1] Hennigan JN، Lynch MD. گذشته، حال و آینده درمان های مبتنی بر آنزیم. Drug Discov امروز. 2022 ژانویه؛ 27 (1): 117-133. doi: 10.1016/j.drudis.2021.09.004.

دریافت نقل قول رایگان

با ما در تماس باشید