In Vitro Sintese van mRNA
Die hoofkomponente van mRNA is die 5’-kap, 5’-UTR, open reading frame (ORF), 3’-UTR en 3’ poli A staart, wat noodsaaklik is vir die onderhoud van mRNA-funksie. Navorsers het ‘n verskeidenheid metodes gebruik om mRNA-reekse en -strukture te identifiseer en optimeer.
Die sintese van mRNA word uitgevoer op grond van in vitro transkripsie (IVT) deur lineêre DNA-sjablone, RNA-polimerase (T3, T7 of SP6), ongewysigde of gewysigde nukleotide, enzieme en toepaslike reagensies te gebruik.
5’ Kap Modifikasie
Die volgorde van volwasse mRNA uit eukaryosiete toon 'n 7-metilguanosien (m7G) kap aan die 5' einde, wat mRNA-stabiliteit en -vertalingsdoeltreffendheid verbeter. Daar is twee algemene metodes vir die vang van mRNA in vitro. Eerstens kan mRNA saam met 'n in vitro-transkripsie gekap word deur 'n kapanalogaat van die m7GpppG-struktuur (bv. CleanCap) aan die IVT-stelsel toe te voeg. Hierdie gelyktydige transkripsiekappingmetode verskaf 'n natuurlike 5' kapselstruktuur en verhoog die kappingsdoeltreffendheid na byna 90-99%. Tweedens kan mRNA-kartografie ook deur enzymreaksies na afloop van die in vitro-transkripsiereaksie voltooi word.
PolyA-wysiging
Die Poly(A) staart verleng ook die halwe-lewe van mRNA in vivo en verbeter die vertaalingsdoeltreffendheid van mRNA. Die lengte van die verlengde poly(A) staart moet tussen 100-300 nukleotiede wees. Verder verhoog gemodifiseerde adenosien die stabiliteit van die poly A staart teen afbreek deur sellulêre RNase. 'n Poly A staart kan ingevoeg word deur in vitro transkripsie met 'n DNA-sjabloon wat poly A kodeer, wat lei tot 'n spesifieke poly A sekwenselengte. Rekombinante poly A polimerase kan ook gebruik word deur enzimatiese polyadenylasie na mRNA-transkripsie.
Nukleotiede Modifikasie
Gewysige nukleoside kan patroonherkeningsreseptor (PRR) herkenning en/of aktivering inhibeer en die doeltreffendheid van mRNA-vakseen verhoog op twee totaal verskillende maniere. Die toevoeging van sekere chemies gemodifiseerde nukleoside, insluitend pseudouridine (ψ), 1-methylpseudouridine (m1ψ), thiouridine (s4U) en 5-methylcytosine (m5C), kan die aktivering van TLR7/8 en ander inheemse immuunreseptore voorkom, wat betekenisvol die immunogeniteit van mRNA verminder.
mRNA-leweringsstelsel
Om die funksie van mRNA te handhaaf, moet dit die gashefstel binnegaan en spesifieke antigene uitdruk. Een van die grootste uitdagings wat mRNA-vaksene en -terapieë teenstaan, lê in die lewer van mRNA na teiken sells met voldoende hoë vertalingsvlakke, wat hoogspesifieke en doeltreffende mRNA-leweringsstelsels vereis. Verskeie mRNA-leweringsvectore is ontwikkel en gebruik, insluitend dendritiese sells (DC's), protamine, katyoniese polimere en katyoniese liposooms.
Komplekse van kationiese lipiede met mRNA en ander voorbereidinge kan gemeenskaplik 80-200 nm-grootte nanopartikels vorm wat lipid nanopartikels (LNPs) genoem word. As een van die mees gevorderde mRNA-leweringsstelsels sluit LNP ioniseerbare kationiese lipiede, natuurlike fosfolipiede, kolesterol en polietheelenglykol (PEG) in. Verskeie RNA-vakswinsels en -terapies (siRNA en mRNA) wat deur die Amerikaanse Voedsel- en Medisynebestuur goedgekeur is, baseer op LNP-leweringsstelsels.
Yaohai Bio-Pharma Bied Eenmalige Oplossing Vir RNA
|
Katalog RNA produkte
- Katalog mRNA Produkte
- Katalog saRNA Produktes
- Katalog circRNA Produktes
|
Aangepaste RNA Sintese
- Aangepaste mRNA Sintese
- Aangepaste saRNA-sintese
- Aangepaste circRNA-sintese
|
mRNA CDMO dienste
- Prosesontwikkeling
- GMP Vervaardiging
- Asptiese invulling en afronding
- Analise en Toetsing
|
Op Maat Lewerbaarhede
|
Graad
|
Leveraans
|
Spesifikasie
|
Toepassingsareas
|
|
nie-GMP
|
Drogsubstansie, mRNA
|
0.1~10 mg (mRNA)
|
Voorkliniese navorsing soos seltransaksie, Analitiese metodeontwikkeling, Voor-stabiliteitsstudies, Formuleringsontwikkeling
|
|
Drogprodukt, LNP-mRNA
|
|
GMP, Steriliteit
|
Drogsubstansie, mRNA
|
10 mg~70 g
|
Ondersoeklike nuwe dop (IND), Kliniese proefautorisering (CTA), Kliniese proefvoorraad, Biologiese lisstoepassing (BLA), Kommerseele voorraad
|
|
Drogprodukt, LNP-mRNA
|
5000 flesies of voorvulde spruitjies/ kartridjes
|
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
