หน้าแรก > IVT อาร์เอ็นเอ > การสังเคราะห์ RNA แบบกำหนดเอง > การสังเคราะห์ circRNA แบบกำหนดเอง > การออกแบบลำดับ circRNA
Yaohai Bio-Pharma เตรียม circRNA โดยใช้ระบบ PIE (การจัดตำแหน่งเอ็กซอนและอินตรอน) ซึ่งอาศัยฟังก์ชันการเชื่อมต่อตัวเองของอินตรอนประเภท I เพื่อให้ได้ RNA cyclization โครงสร้าง PIE ได้รับการออกแบบโดยใช้ยีน T4 td หรือยีนสารตั้งต้น tRNA คาว และการจัดเรียงมีดังนี้:
RNA อินตรอนและแฟรกเมนต์เอ็กซอนที่รองรับแบ่งออกเป็นสองส่วน (เทอร์มินัล 5' และเทอร์มินัล 3') โดยที่ลำดับเทอร์มินัล 5' จะถูกถ่ายโอนไปยังส่วนท้ายของลำดับเป้าหมาย ลำดับเทอร์มินัล 3 ' จะถูกแทรกเข้าที่ด้านหน้าของ ลำดับเป้าหมาย และลำดับยีนเป้าหมายจะถูกแทรกไว้ตรงกลาง
ภายใต้การเร่งปฏิกิริยาของ GTP โครงสร้าง PIE จะนำไปสู่การหมุนเวียนของลำดับอื่นที่ไม่ใช่อินตรอน เมื่อรวมกับกลยุทธ์การเพิ่มอัตราการเป็นวงรอบอย่างสมเหตุสมผล Yaohai Bio-Pharma จะสามารถบรรลุการวนรอบของลำดับได้สูงสุดถึง 4 kb ด้วยอัตราการเป็นวงรอบมากกว่า 80%
รูปที่ 1 การไหลเวียน ในหลอดทดลอง ของ circRNA ตามระบบ PIE
| กระบวนการ | บริการเสริม | รายละเอียดบริการ | ระยะเวลาจัดส่ง (วันทำการ) |
| การออกแบบลำดับ circRNA และการเพิ่มประสิทธิภาพ | การออกแบบและการเพิ่มประสิทธิภาพลำดับการเข้ารหัส | การจัดตำแหน่งลำดับ CDS การเพิ่มประสิทธิภาพรหัส CDS | 1 |
| การออกแบบและการเพิ่มประสิทธิภาพของลำดับที่ไม่เข้ารหัส | การออกแบบและการเพิ่มประสิทธิภาพลำดับอินตรอนและเอ็กซอน การออกแบบลำดับแขนที่คล้ายคลึงกันและการเพิ่มประสิทธิภาพ การออกแบบลำดับและการเพิ่มประสิทธิภาพของตัวเว้นวรรค | 1-2 |
| ส่วนประกอบ CircRNA | ฟังก์ชั่นทางชีวภาพ | กลยุทธ์การเพิ่มประสิทธิภาพ | |
| ลำดับอินตรอนและเอ็กซอนสองเทอร์มินัล | การประกบตัวเองของอินตรอนที่เร่งปฏิกิริยาด้วย GTP สำหรับการหมุนเวียนของลำดับภายนอกอินตรอน | ออกแบบตามยีน T4 td หรือยีน tRNA precursor ของน้ำมันปลา | |
| การเข้ารหัส | ไอเรส | ไซต์การจดจำไรโบโซมภายในที่ควบคุมการแปล circRNA | การคัดกรองลำดับไซต์ไรโบโซมภายใน (IRES) จากแหล่งไวรัสต่างๆ เช่น แหล่ง EMCV, CVB3 |
| CDS | บริเวณที่กำหนดรหัสโปรตีน, ลำดับที่กำหนดรหัสสำหรับแอนติเจน, แอนติบอดีหรือโปรตีนเชิงฟังก์ชันอื่นๆ | การเพิ่มประสิทธิภาพ Codon ช่วยเพิ่มระดับการแปล โคดอนที่ไม่เหมาะสมบางตัวอาจมีบทบาทในการพับโปรตีน | |
| ไม่ใช่การเข้ารหัส | ลำดับที่ไม่เข้ารหัส | กำหนดเป้าหมาย miRNA หรือโปรตีนเพื่อออกแรงควบคุมยีนหรือโปรตีน | การกำหนดเป้าหมายตำแหน่งการจับเฉพาะสำหรับ miRNA หรือโปรตีนสามารถทำซ้ำลำดับของตำแหน่งการจับได้ |
Yaohai Bio-Pharma เปิดตัวผลิตภัณฑ์ควบคุม circRNA ของโปรตีนเรืองแสงสีเขียว (eGFP) ที่ปรับปรุงใหม่ ซึ่งใช้ระบบ PIE เพื่อให้เกิดไซคลิกไลเซชันของ RNA
การใช้รีเอเจนต์การทรานส์เฟกชันแบบธรรมดา eGFP circRNA จะถูกแปลงร่างเป็นเซลล์ 293T และสามารถตรวจพบสัญญาณฟลูออเรสเซนต์ eGFP (สีเขียว) ได้หลังจาก 24 ชั่วโมง ซึ่งจะเพิ่มขึ้นหลังจาก 48 ชั่วโมง สัญญาณฟลูออเรสเซนต์ยังคงสามารถตรวจพบได้ในวันที่ 7 และวันที่ 14 หลังจากนั้น การแปลงร่าง
การตรวจสอบการแสดงออก ในหลอดทดลอง ของ eGFP circRNA
Yaohai Bio-Pharma ให้ความสำคัญกับโซลูชั่น CRDMO ของจุลินทรีย์มานานกว่า 14 ปี เราให้บริการด้านชีววิทยาแบบครบวงจรแก่ลูกค้าทั่วโลก
No. 801, Jiankang Avenue, Taizhou, Jiangsu, China
ลิขสิทธิ์© Yaohai Biopharmaceutical Co., Ltd. สงวนลิขสิทธิ์ | นโยบายความเป็นส่วนตัว | แผนผังเว็บไซต์
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN