หมวดหมู่ทั้งหมด
ENEN
การทดสอบศักยภาพตามเซลล์

การทดสอบศักยภาพตามเซลล์

หน้าแรก >  IVT อาร์เอ็นเอ  >  การวิเคราะห์และการทดสอบ mRNA  >  การทดสอบศักยภาพตามเซลล์

IVT อาร์เอ็นเอ

การทดสอบศักยภาพตามเซลล์

ความสำคัญของการทดสอบศักยภาพ mRNA

ด้วยการพัฒนาอย่างรวดเร็วของวัคซีนและการบำบัดด้วย mRNA จึงจำเป็นต้องมีวิธีการวิเคราะห์เฉพาะเพื่อทดสอบศักยภาพ (กำหนดกิจกรรมทางชีวภาพ) ที่เกี่ยวข้องกับประสิทธิภาพการแปลของ mRNA โดยทั่วไปวิธีการเหล่านี้จะขึ้นอยู่กับการเปลี่ยนถ่ายเซลล์และการสอบวิเคราะห์การทำงานของโปรตีนเป้าหมาย

Yaohai Bio-Pharma นำเสนอการตรวจวิเคราะห์ศักยภาพโดยใช้เซลล์สำหรับสารตัวยา mRNA หรือผลิตภัณฑ์ LNP รวมถึงการเปลี่ยนถ่ายเซลล์ (เซลล์ 293T, HepG2, HeLa, K562, U937, Raw264.7 ฯลฯ) และการตรวจ ELISA หรือ Western Blotting (WB)

ข้อกำหนดด้านกฎระเบียบสำหรับการทดสอบศักยภาพ

ตามการพิจารณาด้านกฎระเบียบของ WHO “ประสิทธิภาพของวัคซีนขั้นสุดท้ายแต่ละล็อตควรถูกกำหนดโดยใช้วิธีการเชิงปริมาณที่เหมาะสมและได้รับการตรวจสอบความถูกต้องแล้ว” การสอบวิเคราะห์ศักยภาพภายนอกร่างกายที่เป็นไปได้อาจรวมถึงระบบทรานส์เฟกชันที่มีเซลล์เป็นพื้นฐานหรือการสอบวิเคราะห์แบบไม่มีเซลล์” และ USP แนะนำให้ "การทดสอบตามเซลล์" เพื่อทดสอบประสิทธิภาพของ mRNA กล่าวคือ การแสดงออกของโปรตีนเป้าหมาย

วิธีวิเคราะห์

การวิเคราะห์

วิธีการ

การทดสอบศักยภาพ

การเปลี่ยนถ่ายตามเซลล์และโปรตีนเป้าหมายระบุ:

293T, HepG2, HeLa, K562, U937, เซลล์ Raw264.7 เป็นต้น
การรักษาอื่นๆ

ขั้นตอนที่ 1 การเปลี่ยนถ่ายตามเซลล์ด้วย mRNA หรือ mRNA-LNP

เซลล์ได้รับการเพาะเลี้ยงและแปลงสภาพด้วย mRNA หรือ mRNA-LNP ในรายละเอียด mRNA จะถูกแปลงร่างหลังจากผสมกับรีเอเจนต์การทรานส์เฟกชัน ในขณะที่ mRNA-LNP จะถูกแปลงร่างเข้าไปในเซลล์โดยตรง หลังจากผ่านไป 24-48 ชั่วโมง ให้ชี้แจงส่วนลอยเหนือตะกอนที่มีโปรตีนที่แสดงออกโดยการหมุนเหวี่ยง

ขั้นตอนที่ 2 การตรวจวิเคราะห์การทำงานของโปรตีนเป้าหมาย

ทำการตรวจ ELISA หรือ WB เพื่อประเมินการเชื่อมโยงเชิงการทำงานของโปรตีนเป้าหมาย

กรณีศึกษา

การสอบวิเคราะห์ศักยภาพตามเซลล์ของตัวอย่าง mRNA

Yaohai-BioPharma ได้พัฒนาวิธีทดสอบศักยภาพโดยใช้เซลล์สำหรับ mRNA ซึ่งเกี่ยวข้องกับการเพาะเลี้ยงเซลล์ การถ่ายเซลล์ และการตรวจการทำงานของโปรตีน เราแปลง eGFP mRNA, mCherry mRNA, luciferase mRNA, สไปค์โปรตีน mRNA เข้าไปในเซลล์ 293T และตรวจพบโปรตีนเป้าหมายผ่านการเรืองแสง สัญญาณเรืองแสงหรือสี, WB, ELISA

5

การทดสอบศักยภาพตามเซลล์ของผลิตภัณฑ์ mRNA โดย Yaohai Bio-Pharma

กดรับใบเสนอราคา

ติดต่อเรา