ตามหลักการพื้นฐานของชีววิทยา (central dogma) สารพันธุกรรม RNA (mRNA) เป็นสะพานเชื่อมโยงสำหรับการถ่ายทอดสารพันธุกรรมจาก DNA ไปยังโปรตีน
mRNA มีบทบาททางชีวภาพโดยการเข้ารหัสโปรตีนในร่างกาย และ mRNA ที่สุกงอมในสิ่งมีชีวิตแบบยูคาริโอตประกอบด้วยห้าองค์ประกอบ: 5' Cap (โครงสร้างหมวก), 5' UTR (เขตที่ไม่ได้เข้ารหัส), ORF (เขตอ่านเปิด), 3' UTR, และ 3' polyA tail (หางโพลีอะดีนิเลต)
รายละเอียดบริการ
| กระบวนการ |
บริการเพิ่มเติม |
รายละเอียดบริการ |
ระยะเวลาส่งมอบ (วัน) |
| การออกแบบและปรับแต่งลำดับ mRNA |
การออกแบบและปรับแต่งลำดับรหัสพันธุกรรม |
การจัดเรียงลำดับ CDS
การปรับแต่งโคโดนของ CDS
|
1 |
| การออกแบบและปรับแต่งลำดับที่ไม่ใช้รหัสพันธุกรรม |
การออกแบบและปรับแต่งลำดับ 5' UTR
การออกแบบและปรับแต่งลำดับ 3' UTR
การออกแบบและปรับแต่งลำดับ polyA
|
1-2 |
ตัวเลือกที่สามารถปรับแต่งได้
| 5' UTR/3' UTR |
- ลำดับ UTR ตามธรรมชาติ
- ลำดับ UTR กลายพันธุ์/ออกแบบใหม่
|
| หาง PolyA 3' |
- หาง A 100~120A (แนะนำ)
- หาง polyA แบบแบ่งส่วน
- หางแบบกำหนดเองอื่นๆ
|
กลยุทธ์ทั่วไปสำหรับการออกแบบลำดับ mRNA
| ส่วนประกอบของ mRNA |
ฟังก์ชันทางชีวภาพ |
กลยุทธ์การปรับแต่ง |
| cog 5' |
ปกป้อง mRNA จากการเสื่อมสภาพโดย exonucleases และทำงานร่วมกับหาง polyA ที่ปลาย 3', โปรตีนผูกพัน polyA และโปรตีนปัจจัยเริ่มต้นการแปลเพื่อเริ่มต้นการแปลผลเป็นโปรตีน |
โครงสร้าง Cap1 ตามธรรมชาติหลีกเลี่ยงตัวรับรู้รูปแบบและลดการตอบสนองภูมิคุ้มกันตามธรรมชาติ ซึ่งสามารถทำได้โดยการ加盖แบบ co-transcriptional ในขั้นตอนเดียวหรือการ加盖ด้วยเอนไซม์ในสองขั้นตอน [ดูรายละเอียดเกี่ยวกับการ加盖 mRNA ด้วยเอนไซม์และการ加盖แบบ co-transcriptional] |
| 5' UTR |
5' UTR สามารถถูกจำแนกโดย ribosomes ควบคุมการแปล mRNA และส่งผลต่อความเสถียรของ mRNA |
มีลำดับ Kozak โดยไม่มีโครงสร้างตัวรองที่เสถียรมากจนเกินไป ยูเทริ่งธรรมชาติของยีนที่แสดงออกอย่างสูงเป็นที่นิยมสำหรับ mRNA การถอดแบบในหลอดทดลอง เช่น α-globin และ β-globin |
| CDS |
พื้นที่รหัสโปรตีนและลำดับรหัสสำหรับแอนติเจน แอนติบอดี หรือโปรตีนที่ทำงานอื่น ๆ |
การปรับแต่งโคดอนเพิ่มระดับของการแปลรหัส พิจารณาว่าโคดอนที่ไม่เหมาะสมบางตัวอาจมีบทบาทในการพับโปรตีน |
| 3' UTR |
ควบคุมการแปลรหัส mRNA และความเสถียร |
ยูเทริ่งธรรมชาติของยีนที่แสดงออกอย่างสูงเป็นที่นิยมสำหรับ mRNA การถอดแบบในหลอดทดลอง เช่น α-globin และ β-globin |
| หาง polyA ที่ตำแหน่ง 3' |
ควบคุมการแสดงออกของโปรตีนและปกป้องโครงสร้างแคปจากการเสื่อมสภาพ |
จำเป็นต้องมีความยาวที่เหมาะสม (100-150 บพ) การเขียนรหัส polyA tail ในพลาสมิดแม่แบบการถอดแบบช่วยให้มีความยาว polyA tail ที่กำหนดได้ดีขึ้น |
คุณลักษณะของเรา
- การเลือกแหล่ง UTR ที่หลากหลาย
แหล่ง UTR ธรรมชาติและปรับแต่งที่มีการแสดงออกสูงหลายแหล่ง; กลยุทธ์การแก้ไข UTR ที่พัฒนาแล้ว;
- ทีมเพิ่มประสิทธิภาพ CDS ที่ล้ำสมัย
ร่วมมือกับทีมอัลกอริธึม AI มืออาชีพเพื่อดำเนินการเพิ่มประสิทธิภาพโคดอน;
- การกระจาย polyA tail อย่างเท่าเทียม
เพิ่มลำดับ polyA ตามเทมเพลต DNA เพื่อควบคุมความยาวของ mRNA ได้อย่างแม่นยำขึ้น;
- การผสมผสานการเพิ่มประสิทธิภาพที่หลากหลาย
บรรลุการแสดงออกที่มีประสิทธิภาพของ mRNA พร้อมกับการกระตุ้นทางภูมิคุ้มกันต่ำ;
กรณีศึกษา
การออกแบบลำดับของ mRNA แบบ Dual-reporter: mCherry-eGFP mRNA
บริการ mRNA จาก Yaohai Bio-Pharma ยังคงได้รับการอัปเกรดด้วยการออกแบบและการเพิ่มประสิทธิภาพของลำดับจีโนมรายงานสองชนิดที่เชื่อมต่อกัน ซึ่งสามารถแสดงผลของยีนคู่ได้ในเวลาเดียวกัน
เมื่อใช้สารช่วยการ transfected แบบทั่วไป ลำดับพันธุกรรมคู่ mCherry-eGFP mRNA จะถูก transfected เข้าสู่เซลล์ 293T และจะตรวจพบสัญญาณฟลูออเรสเซนต์สองชนิดของ mCherry (สีแดง) และโปรตีนฟลูออเรสเซนต์สีเขียวแบบเพิ่มประสิทธิภาพ (eGFP) หลังจาก 48 ชั่วโมง โดยมีการแสดงผลร่วมกัน และกราฟซ้อนทับจะเน้นด้วยสีเหลือง
การแสดงออกของ mRNA mCherry-eGFP ในเซลล์ 293T
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
