รากฐานของการห่อหุ้มคือการออกแบบและการพัฒนาระบบการส่งมอบ ระบบการส่งมอบที่ออกแบบอย่างดีจะทำให้โมเลกุล circRNA เข้าสู่ร่างกายโดยไม่ถูกย่อยสลายโดยเอนไซม์ RNA และจากนั้นถูกส่งมอบไปยังเป้าหมายอย่างมีประสิทธิภาพ ข้ามเยื่อหุ้มเซลล์ และปลดปล่อยภายในเซลล์
อนุภาคไขมัน (Lipid Nanoparticles: LNPs) เป็นระบบการส่งมอบที่ดีที่สุดในปัจจุบัน โดยมีข้อได้เปรียบในเรื่องของการห่อหุ้ม การแสดงออกในสิ่งมีชีวิต และความปลอดภัยในสิ่งมีชีวิตเมื่อเทียบกับระบบการส่งมอบอื่น ๆ อนุภาค LNPs ที่มีเศษลำดับนิวคลีอิกสามารถถูกกลืนเข้าไปในเซลล์และก่อตัวเป็นโครงสร้างภายในเซลล์ เมื่อเข้าสู่เซลล์ สภาพแวดล้อมที่เป็นกรดของโครงสร้างภายในเซลล์จะทำให้เกิดการโปรตอนเนตของสารไขมันไอออนิก ซึ่งเปลี่ยนประจุเป็นบวก และรวมตัวกับเยื่อหุ้มของโครงสร้างภายในเซลล์เพื่อปล่อยลำดับนิวคลีอิกเป้าหมายออกมาภายในเซลล์สำหรับการทำงาน
บริการ circRNA จาก Yaohai Bio-Pharma ยังคงพัฒนาอย่างต่อเนื่อง และสามารถให้บริการห่อหุ้ม circRNA-LNP เพื่อปรับปรุงพารามิเตอร์กระบวนการสำคัญที่เกี่ยวข้อง และเพิ่มความสม่ำเสมอและความสามารถในการทำซ้ำของการผลิตยา circRNA
กระบวนการ | รายละเอียดบริการ | ระยะเวลาส่งมอบ (วัน) | สิ่งที่จะได้รับ |
การห่อหุ้ม circRNA-LNP | การเตรียมวัสดุและของเหลว | 2 | ผลิตภัณฑ์ยา circRNA-LNP (Drug Product: DP) |
การผสมด้วยอุปกรณ์ Microfluidic | |||
การกรองแบบ Tangential Flow | 1 | ||
การกรองแบบฆ่าเชื้อ | |||
การควบคุมคุณภาพ circRNA-LNP | ประสิทธิภาพการห่อหุ้ม | 1 | รายงานผลการทดสอบ |
ขนาดอนุภาคและดัชนีความหลากหลายของอนุภาค | |||
ศักย์เซต้า |
การสังเคราะห์อย่างรวดเร็ว ประสิทธิภาพการวิจัยและพัฒนาสูง และมีวิธีแก้ปัญหาที่ปรับแต่งล่วงหน้า;
อัตราส่วนการห่อหุ้มสามารถถึงมากกว่า 90%;
ขนาดของลิพิดนาโนพาร์ทิเคิลสามารถควบคุมได้โดยการเปลี่ยนอัตราและสัดส่วนของการฉีดสารน้ำ;
ผลิตภัณฑ์ circRNA-LNP ได้รับการตรวจสอบโดยการทดลองในเซลล์ในห้องปฏิบัติการ และสามารถแสดงโปรตีนเป้าหมายได้อย่างมีประสิทธิภาพ
ตัวอย่าง LNP-eGFP circRNA ถูกเตรียมขึ้นและปริมาณต่าง ๆ ของมัน (1ug, 2ug, และ 4ug) ถูกนำเข้าสู่เซลล์ 293T โดยตรง เพื่อตรวจสอบว่าสามารถแสดงโปรตีนเป้าหมายได้หรือไม่ หลังจากทำการนำเข้าเป็นเวลา 48 ชั่วโมง จะเห็นสัญญาณฟลูออเรสเซนซ์อย่างชัดเจน และมีผลกระทบจากการเพิ่มปริมาณของความเข้มแสง;
Lipo-circ_eGFP ซึ่งประกอบด้วยลิโพโซมและ eGFP circRNA ที่ไม่ได้ห่อหุ้ม ถูกใช้เป็นกลุ่มควบคุม.