toate categoriile
Enzima recombinantă

Enzima recombinantă

Acasă >  Modalitatea  >  Proteine  >  Enzima recombinantă

Modalitatea

Enzime recombinante

Enzimă recombinantă pentru uz terapeutic

Enzimele terapeutice obținute prin procese biotehnologice sunt utilizate pe scară largă pentru mai multe aplicații clinice, inclusiv terapia de substituție enzimatică, degradarea metaboliților și a toxinelor acumulate, tratamentul cancerului și editarea genomului. În sistemul de expresie microbiană pot fi produse mai multe enzime terapeutice.

aplicație

Enzime

Substanță

Produse/Conducte tipice

Terapia de înlocuire a enzimelor

Adenozin deaminaza, ADA

Adenozină sau deoxiadenozină

Elapegademase-lvlr (Revcovi)

Fenilalanină amoniac lază, PAL

fenilalanina

Pegvaliase-pqpz (Palynziq)

Degradarea metaboliților acumulați

Uricaza/Urat Oxidaza

Acidul uric

Peglticaza (Krystexxa) Rasburicase (Fasturtec)

Colagenaza

„cicatrice” de colagen

Colagenaza clostridium histolyticum (Xiaflex, Qwo, Santyl)

Plasmină trunchiată

Colagen, fibronectină și laminină

Ocriplasmină (Jetrea)

Activator de plasminogen tisular trunchiat (tPA)

Plasminogen

Reteplase (Retavase)

proteaza IgG

Imunoglobulina G (IgG)

Imlifidază (Idefrix)

proteaza IgA

Imunoglobulină A (IgA)

PKU308/AP308IGAN IgA proteaza

Degradarea toxinelor

Carboxipeptidaza G2

Metotrexat

Glucarpidază (Voraxaze)

Tratament pentru cancer

Enzimă specifică asparaginei

asparagină

Asparaginază (Elspar) Calaspargaze pegol-mknl (Asparlas)

Editarea genomului

nuclează Cas9

Gena țintă

Exagamglogen autotemcel (Exa-cel, CTX001)

Enzima recombinantă ca material

Există mai multe enzime utilizate în producția de ARN cu codare lungă (de exemplu, ARNm, saRNA, circRNA), producția de conjugați anticorp-medicament (ADC) și altele. Enzimele produse de microbi sunt mai rentabile decât celula de mamifer, în special sistemul de exprimare a E. coli.

aplicație

Enzime

Funcţie

Enzime pentru producția liniară de ARN, fără RNază

Endonucleaze de restricție

Liniarizarea ADN-ului plasmid (pDNA) pentru a evita generarea de transcript mai lung.

T7 ARN polimeraza (T7 RNAP)

Se leagă de promotorul T7 și generează transcriptul ARN specific; Joacă un rol cheie în timpul reacției de transcriere in vitro (IVT).

Enzima de acoperire a vaccinului

Adăugați structuri Cap la capetele 5′ ale ARNm IVT.

Pirofosfatază anorganică (iPPază)

Preveniți pirofosfatul în timpul reacției IVT.

Inhibitor de RNază, recombinant

Inhiba activitatea RNazelor în timpul reacției IVT.

ADNza I

Îndepărtați șablonul ADN.

Enzimă pentru producția de ARN-circ, fără RNază

RNaza R

Digerați ARN-ul liniar și îmbogățiți ARN-ul circular.

Conjugarea glicanului mediată de enzime

Peptida-N-glicozidaza (PNGaza F)

Desprinde legătura amidă dintre prima zaharidă GlcNAc și lanțul lateral Asn297 L; Eliberează glicanii din anticorpii IgG.

Transglutaminaza bacteriană (BTG)

Conjugați încărcăturile utile în mod specific pentru a genera ADC-uri.

Sortase A

Catalizează legarea proteinelor.

β1,4-galactozidază

Se eliberează toate galactozele terminale și se formează o izoformă G0 omogenă a anticorpului.

β1,4-galactosiltransferaza (Gal-T)

Transferați un reziduu de zahăr cu o grupă funcțională reactivă chimic.

α2,6-sialiltransferaza (Sial T)

Încorporează reziduuri terminale de acid sialic în structura glicanului nativ a unui anticorp.

Remodelarea glicanului mediată de enzime și glicoingineria

Endo-N-acetilglucozaminidaza (ENGaza)

Hidrolizează legătura β1,4-glicozidică dintre GlcNAcβ1–4GlcNAc a N-glicanilor; Îndepărtați glicanii N-legați din regiunea Fc a anticorpilor IgG.

Endoglicozidaza S (EndoS)

Glicoziltransferaze (GT)

Se transferă N-glican oxazolină la IgG defucozilate.

Altele

Enzime produse de tulpina microbiană

Nevoie personalizată

Enzima recombinantă ca reactiv
Proteaze de îndepărtare a etichetelor

Etichetele de fuziune sunt adesea folosite pentru a îmbunătăți solubilitatea și stabilitatea proteinelor recombinante de interes și pentru a le face mai ușor de purificat. Etichetele utilizate în mod obișnuit includ eticheta His, proteina de legare a maltozei (MBP), glutation-s-transferaza (GST) etc.

De obicei, o secvenţă linker este adăugată între eticheta de fuziune şi secvenţa proteinei ţintă pentru a îndepărta eticheta. Îndepărtarea etichetelor de fuziune necesită proteaze specifice locului, cum ar fi enterokinaza (EK), trombina, proteaza virusului de gravare a tutunului (TEVp), proteaza de rinovirus uman 3C (HRV3C), proteaza mică de modificare a ubiquitinei (SUMO), virusul petelui din vene de tutun ( TVMV) protează și carboxipeptidaza A/B (CPA/CPB).

Tip

Enzime

Site de recunoaștere

Endoproteazele de îndepărtare a etichetelor

Enterokinază (EK), enteropeptidază

DDDDK↓

trombină

LVPR↓GS

proteaza TEV

ENLYFQ↓G

proteaza HRV3C

LEVLFQ↓GP

SUMO proteaza

Structura terţiară SUMO

proteaza TVMV

ETVRFQG↓S

Exoproteazele de îndepărtare a etichetelor

Carboxipeptidaza A (CPA)

Aminoacizii C-terminali, cu excepția Pro, Lys și Arg

Carboxipeptidaza B (CPB)

Lys C-terminal și Arg

Alte proteaze, nucleaze și amidaze

aplicație

Enzime

Funcţie

Alte proteaze

Proteaza K

O serin protează care digeră proteinele prin hidroliza legăturilor peptidice.

IdeS, proteaza IgG

Enzime de degradare a IgG (Ide) care se scindează la un loc specific al imunoglobulinei G (IgG), generând fragmente Fab și Fc

proteaza IgA1

O enzimă proteolitică care scindează un situs specific din secvența regiunii balama a imunoglobulinei umane A1 (IgA1).

Nuclează

Nuclează

Scinda acizii nucleici (ADN sau ARN) prin hidroliza legăturilor fosfodiester.

Restricționează enzima

O endonuclează care scindează ADN-ul la sau în apropierea unor locuri specifice.

Amidaza

PNGase F

Se scindează între resturile cele mai interne de N-acetilglucozamină (GlcNAc) și asparagină ale oligozaharidelor complexe, hibride și de manoză.

Yaohai Bio-Pharma oferă o soluție CDMO unică pentru enzimele recombinante
De referinţă:

[1] Hennigan JN, Lynch MD. Trecutul, prezentul și viitorul terapiilor pe bază de enzime. Drug Discov Astăzi. 2022 ian;27(1):117-133. doi: 10.1016/j.drudis.2021.09.004.

Obțineți o Consultație Gratuită

Contactați-ne