Dezvoltarea proceselor ARNm - Yaohai Biopharmaceutical Co., Ltd.

ADN plasmid circular (pDNA), ca material de pornire, ar trebui să fie complet liniarizat pentru a produce un transcript ARN cu lungime definită.
Ca strategie comună de sinteză pentru moleculele de ARN, transcriere in vitro (IVT) ne permite să obținem în mod eficient transcrieri personalizate. IVT este o reacție complexă care necesită un amestec de matriță ADN, ARN polimerază, inhibitor de RNază, pirofosfatază anorganică, co-factori, trifosfați nucleozidici (NTP) nemodificați sau modificați și tampon pentru a produce transcrieri ARNm. Randamentul ideal de ARN nu poate fi atins cu o singură soluție, deoarece depinde de diverși factori de reacție. În plus, reacția IVT poate fi dependentă de secvență.
După reacția IVT, cel impurități legate de produs și proces (de exemplu, dsARN, fragmente trunchiate de ARN, matriță ADN, NTP și ARN polimeraza) trebuie îndepărtate pentru a obține ARNm pur ca ingredient farmaceutic activ (API).

Serviciile noastre generale de dezvoltare a proceselor ARNm disponibile includ:

Calitate prin proiectare (QbD)

Design of Experience (DoE)

Un factor la un moment dat (OFAT)

Detalii despre servicii	Operațiuni de unitate	parametrii
Digestia cu o singură enzimă	Reacția de digestie	Componentele reacției, volumul, viteza de rotație
Purificarea ADN linearizată	IEX, cromatografie cu schimb de anioni sau cationi	Tipuri de rășină cromatografică/coloană Compoziție tampon, compoziție fază mobilă, pH, debit, legare, spălare și condiții de eluare.
Purificarea ADN linearizată	RPC, cromatografie cu fază inversă
Sinteza ARNm prin IVT	Reacția IVT	Componentele reacției IVT, volumul, viteza de rotație, timpul IVT
Sinteza ARNm prin IVT	îndepărtarea ADN-ului	Concentrația de DNază
Capacul enzimatic	Reacție de plafonare	Componentele reacției, volumul, viteza de rotație
Purificarea ARNm	AC, Cromatografia de afinitate	Mai multe tipuri de rășină/coloană de cromatografie (de exemplu, AC, IEX, RPC, SEC, MMC), compoziție tampon, volum de injectare, compoziție în fază mobilă (adsorbție și desorbție), pH, debit, legare, spălare și condiții de eluare.
	IEX, cromatografia cu schimb de anioni sau cationi
	SEC, desalinizare și/sau cromatografie de excludere dimensională
	RPC, cromatografie în fază inversă
	MMC, cromatografie în mod mixt
	Filtrare în flux tangenţial	Materialul membranei și dimensiunea porilor, debitul de alimentare, presiunea transmembranară (TMP), raportul dintre volumul filtratului și suprafața membranei

Dezvoltarea procesului ARNm