Baza încapsulării este proiectarea și dezvoltarea sistemului de livrare. Un sistem de livrare bine conceput permite moleculelor de ARN-circn să intre în organism fără a fi degradate de enzimele ARN și apoi să fie livrate în mod eficient la locul țintă, să traverseze membrana celulară și să fie eliberate intracelular.
Nanoparticulele lipidice (LNP) sunt cel mai bun sistem de livrare disponibil, cu avantaje în încapsulare, exprimare in vivo și siguranță in vivo în comparație cu alte sisteme de livrare. LNP-urile cu fragmente de acid nucleic sunt ușor înghițite în celule și formează corpuri intracelulare. Odată intrat în celulă, mediul acid al corpului intracelular protonează și încarcă pozitiv capul lipidei ionizate, fuzionand astfel cu membrana interioară a corpului intracelular și eliberând acidul nucleic țintă în celulă pentru acțiune.
Serviciul Yaohai Bio-Pharma circRNA continuă să se îmbunătățească și poate oferi serviciu de încapsulare circRNA-LNP pentru a optimiza parametrii critici relevanți ai procesului și pentru a îmbunătăți consistența și reproductibilitatea producției de medicamente circRNA.
Proces | Detalii despre servicii | Perioada de livrare (zi) | livrabile |
încapsularea circRNA-LNP | Pretratare material și lichid | 2 | produs medicamentos circRNA-LNP (DP) |
Amestecare cu dispozitive microfluidice | |||
Filtrare în flux tangenţial | 1 | ||
Filtrare de sterilizare | |||
controlul calității circRNA-LNP | Eficiența încapsulării | 1 | Raport de testare |
Dimensiunea particulelor și indicele de polidispersitate | |||
Potențial zeta |
Sinteză rapidă, eficiență ridicată în cercetare și dezvoltare și soluții pre-optimizate;
Raportul de încapsulare poate ajunge la mai mult de 90%;
Dimensiunea nanoparticulelor lipidice poate fi controlată prin modificarea ratei și raportului de injectare a fluidului;
Produsele circRNA-LNP sunt validate prin expresia celulară in vitro și pot exprima eficient proteina țintă.
Sunt preparate probe de circARN LNP-eGFP și diferitele doze ale acestora (1 ug, 2 ug și 4 ug) sunt transfectate direct în celule 293T pentru a verifica dacă pot exprima proteina țintă. După 48 de ore de transfecție, se poate observa un semnal fluorescent clar și există un efect de escaladare a dozei a intensității fluorescenței.
Lipo-circ_eGFP, alcătuit din lipozomi și circRNA eGFP neîncapsulat este luat ca control.