Semnificația screening-ului de strain
Screening-ul gazdilor potriviti este necesar pentru dezvoltarea CMC a biologiclelor, care determină calitatea și consistența produsului și a procesului de fabricație. Obiectivul direct al screening-ului gazdilor este de a furniza o bancă primară de celule (PCB) candidat, cu niveluri ridicate de expresie și stabilitate, atât în ceea ce privește stabilitatea pasajelor cât și stabilitatea la stocare. Screening-ul gazdilor potriviti este necesar din două motive principale:
- În primul rând, pentru a selecta gazda microbială cu un nivel ridicat de expresie. Există mai multe strain-uri comerciale disponibile, care sunt folosite pentru a exprima diferite tipuri de proteine, cum ar fi proteine toxice, proteine solubile sau proteine eucariote.
- În al doilea rând, să se evalueze gazda cu stabilitate genetică. Testarea stabilității genetice este un punct cheie pe tot parcursul ciclului de viață al producției. Se sugerează ca o stabilitate genetică ridicată să fie recunoscută drept altă caracteristică cheie pentru strain-ul potrivit.
Cuvinte cheie: selecția strain-urilor microbiene, ecranearea strain-urilor microbiene, ecraneare la înaltă printruzie a bacteriilor sau levurilor, ecranearea strain-urilor cu producție ridicată, ecranearea strain-urilor foarte stabilite, ecranearea strain-urilor cu stabilitate genetică Aplicație: medicină umană, medicină animală, vaccinuri, biologie sintetică, biologice recombinante de mare mărime, reagent biologic
Servicii de Ecraneare a Strain-urilor Yaohai Bio-Pharma
Beneficiind de peste 10 ani de experiență în CDMO în domeniul biologilor microbieni, sprijinim dezvoltarea și fabricarea diverselor molecule mari, inclusiv vaccine subunitare recombinate, particule simil-virus (VLP), hormoni (insulină, GLP-1, hormonul de creștere), citocine (Interleucin-2/IL-2, IL-15, IL-21), factori de creștere (EGF, FGF, NGF), nanocorpuri/anticorpi cu domeniu unic (sdAbs), enzyme, etc.
Am acumulat o bogată experiență în selecția diferitelor tipuri de vectori plasmidiali și gazde microbiene, inclusiv Bacterii Escherichia coli (E. coli), și levură Pichia pastoris (P. pastoris), Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae), Hansenula polymorpha (H. polymorpha). Putem găsi cel mai bun sistem de expresie pentru biologicele dvs. unice.
Am colectat diverse gazde microbiene cu surse clare și CoA standard, inclusiv E.Coli expresie bacteriană și expresie la levură.
Detalii ale Serviciului
|
Servicii
|
Detalii ale Serviciului
|
Timp minim/Timp zile
|
Rezultate prezentabile
|
|
Construcție a știruii (E. coli)
|
Transformare cu plasmid (multi-gazde)
|
5
|
COA al gazdelor comerciale Raport de construcție a știruii
|
|
Verificare prin PCR
|
|
Purificarea știrii
|
|
Păstrarea știrii
|
|
Construcție a știrii (levur)
|
Prepararea celulelor competente de levur
|
10
|
|
Liniarizarea plasmidului
|
|
Transformare electro
|
|
Testare a rezistenței / deficienței nutriționale
|
|
Purificarea știrii
|
|
Păstrarea știrii
|
|
Ecrânare gazdă potrivită
|
Extracție DNA plasmid sau genom
|
15-20
|
Proces de ecrânare a gazdei COA al știrilor inginerite
|
|
Verificare PCR, digestie cu enzyme de restricție
|
|
Sequențiere Gen Target
|
|
Ecrânare a gazdelor cu expresie ridicată
|
|
Ecrânare a gazdelor cu stabilitate genetică
|
|
Păstrarea știrii
|
Studiu de caz
O gazdă potrivită îmbunătățește nivelul de expresie a proteinelor de 2.5 ori.
Sunt comisionați să dezvoltăm olini cu producție înaltă E. coli strain. Iar noi am încercat trei tipuri de gazde comerciale E. coli gazde, bazate pe caracteristicile proteinului țintă. S-a arătat că olinile S1-1 și S1-2 (Fig A: Lane 1,2) au îmbunătățit nivelul de proteină până la 3,5 ori mai mult decât olinia inițială a clientului (Fig A: Lane 3).
De asemenea, olinile S1-1 au demonstrat o stabilitate genetică ridicată (Fig B), iar acestea au fost recunoscute ca oline candidat pentru bancarea primară a celulelor (PCB).
Caracteristici ale Serviciului Nostru
Experiență dovedită cu diferite gazde microbiene, de exemplu, E. coli DH5α, TOP10, Trans10, BL21; P. pastoris SMD1168H, X-33, GS115, PichiaPink strain1/2/3/4; S. cerevisiae și H. polymorpha .
Avem experiență cu E. coli secțiunea periplasmatică, expresia solubilă și a corpurilor de incluziune, precum și expresia intracelulară sau de secțiune a levurilor. Nu adăugăm antibiotice sau adăugăm antibiotice în conformitate cu reglementările.
Stabilim o platformă de screening cu printr-un flux mare pentru a selecta ceștii cu o producție ridicată și stabile din peste sute de cești candidat.
Este asigurat că procesul de inginerie genetică a ceștilor și de screening este urmărit, în conformitate cu Bunele Practici de Gestionare a Datelor și a Documentelor.
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
