Analiza locului de N-glicozilare este crucială pentru înțelegerea funcțiilor glicanilor. Yaohai Bio-Pharma folosește cromatografie lichidă-spectrometrie de masă (LC-MS) după scindarea enzimatică pentru situsul de N-glicozilare.
Am fost implicați în caracterizarea structurală a proteinelor a diferitelor molecule mari, inclusiv vaccinuri subunități recombinante, nanocorpi/VHH/anticorpi cu un singur domeniu (sdAbs), fragmente de anticorpi, hormoni/peptide, citokine, factori de creștere (GF), enzime, colageni, etc.
Cerințe de reglementare pentru locul de N-glicozilare
Conform ghidului ICH Q6B, „pentru glicoproteine, se determină conținutul de carbohidrați (zaharuri neutre, aminozaharuri și acizi sialici). Mai mult, structura lanțurilor de carbohidrați, modelul de oligozaharidă (profilul antenar) și situsurile de glicozilare ale lanțului polipeptidic sunt analizate în cea mai bună măsură posibilă.
Metoda analitică
Analiză |
Aplicate |
Locul de N-glicozilare |
Cromatografie lichidă-spectrometrie de masă (LC-MS) după clivaj enzimatic |
Proceduri
1. Digestia enzimatică a proteinei folosind tripsină sau altă protează
2. Glicopeptide fragmente separate
3. Confirmați locul de N-glicozilare prin LC-MS
4. Analizați datele